Pāriet uz saturu
SF188
Audums
Smadzenes, labais priekšējais lobus
Slimība
Glioblastoma
Sinonīmi
SF-188, SF 188

Dokumenti

SF188

Cell line · Preces numurs 305870

SF188 šūnu līnija ir cilvēka daudzveidīgās glioblastomas (GBM) modelis, kas izveidots, izmantojot bērna pacienta šūnas. To plaši izmanto, lai pētītu mehānismus...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SF188 šūnu līnija ir cilvēka daudzveidīgās glioblastomas (GBM) modelis, kas izveidots, izmantojot bērna pacienta šūnas. To plaši izmanto, lai pētītu rezistences pret ķīmijterapiju mehānismus, jo īpaši pret alkilējošām vielām, piemēram, 1,3-bis(2-hloretil)-1-nitrozurīnu (BCNU). Salīdzinot ar citām no gliomām iegūtām šūnu līnijām, piemēram, SF126, SF188 izrāda ievērojami augstāku rezistenci pret BCNU izraisīto citotoksicitāti un genotoksicitāti. Konkrēti, SF188 izrāda aptuveni trīskārt lielāku rezistenci izdzīvošanas testos un 14 reizes mazāku uzņēmību pret BCNU izraisītu māsas hromatīdu apmaiņu (SCE), kas liecina par izteiktu DNS bojājumu tolerances fenotipu.

SF188 rezistenci saista ar uzlabotu DNS remonta spēju, jo īpaši ar ātru un efektīvu O6-alkilguanīna aduktus noņemšanu. Pēc iedarbības ar metilējošiem aģentiem, piemēram, N-metil-N-nitrozourea, SF188 šūnas parāda izteiktu O6-metilguanīna bojājumu noņemšanu, turpretim jutīgākās šūnu līnijas parāda minimālu reparācijas aktivitāti. Šī efektīvā bojājumu reparācija, visticamāk, novērš starpķēžu krustsaikņu veidošanos, tādējādi saglabājot genoma integritāti un palielinot šūnu izdzīvošanu. Svarīgi, ka SF188 šūnām ir arī liels hromosomu skaits (modālais skaits 91) un tajās netiek ekspresēts gliofibrilārais skābais proteīns (GFAP), kas apstiprina šīs šūnu līnijas vāji diferencēto gliomas izcelsmi un padara to par izcilu modeli, lai pētītu mijiedarbību starp DNS reparāciju un ķīmijterapijas rezistenci augstas pakāpes gliomās.

Audums
Smadzenes, labais priekšējais lobus
Slimība
Glioblastoma
Sinonīmi
  • SF-188
  • SF 188

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
26 stundas

04Identifikatori

Atsauce
SF188 (Cytion kataloga numurs 305870)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: TP53, vienkārša, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozigota (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 līdz 4 × 10⁴ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
8 gadi