الانتقال إلى المحتوى
SF188
الأنسجة
الدماغ، الفص الجبهي الأيمن
المرض
الورم الأرومي الدبقي
المرادفات
SF-188, SF 188

المستندات

SF188

Cell line · رقم المنتج 305870

سلسلة الخلايا SF188 هي نموذج لورم دبقي متعدد الأشكال (GBM) بشري تم إنشاؤه من عينة مأخوذة من مريض طفل. وتُستخدم على نطاق واسع لدراسة آليات...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُعد خط الخلايا SF188 نموذجًا لورم الدبقي المتعدد الأشكال (GBM) البشري، تم إنشاؤه من عينة مأخوذة من مريض طفل. ويُستخدم على نطاق واسع لدراسة آليات مقاومة العلاج الكيميائي، لا سيما للعوامل الألكلة مثل 1,3-بيس(2-كلوروإيثيل)-1-نيتروزوريا (BCNU). بالمقارنة مع سلالات خلوية أخرى مشتقة من الورم الدبقي مثل SF126، يُظهر SF188 مقاومة أعلى بشكل ملحوظ للسمية الخلوية والسمية الجينية التي يسببها BCNU. وعلى وجه التحديد، يُظهر SF188 مقاومة أكبر بنحو ثلاثة أضعاف في اختبارات البقاء على قيد الحياة وقابلية أقل بـ 14 ضعفًا لتبادل الكروماتيدات الشقيقة (SCE) الناجم عن BCNU، مما يشير إلى نمط ظاهري قوي لتحمل تلف الحمض النووي.

وتُعزى المقاومة في SF188 إلى قدرة محسّنة على إصلاح الحمض النووي، لا سيما الإزالة السريعة والفعالة لمركبات O6-ألكيلغوانين. عند التعرض لعوامل الميثلة مثل N-ميثيل-N-نيتروزوريا، تُظهر خلايا SF188 إزالة ملحوظة لآفات O6-ميثيلغوانين، في حين تُظهر السلالات الخلوية الأكثر حساسية نشاط إصلاح ضئيلًا. ومن المرجح أن هذا الإصلاح الفعال للآفات يمنع تكوين الروابط المتقاطعة بين السلاسل، مما يحافظ على سلامة الجينوم ويزيد من بقاء الخلايا. والأهم من ذلك، أن SF188 تُظهر أيضًا عددًا كروموسوميًا مرتفعًا (العدد الوسيط 91) وتفتقر إلى التعبير عن البروتين الحمضي الليفي الدبقي (GFAP)، مما يؤكد أصلها من ورم دبقي ضعيف التمايز ويجعلها نموذجًا ممتازًا لدراسة التفاعل بين إصلاح الحمض النووي ومقاومة العلاج الكيميائي في الأورام الدبقية عالية الدرجة.

الأنسجة
الدماغ، الفص الجبهي الأيمن
المرض
الورم الأرومي الدبقي
المرادفات
  • SF-188
  • SF 188

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

زمن المضاعفة
26 ساعة

04المعرّفات

المرجع
SF188 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305870)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_6948

05التعبير والقابلية للإصابة

الأنماط الطفريّة
الطفرة: TP53، بسيطة، p.Gly266Glu (c.797G>A)، متماثلة (PubMed=9614553، PubMed=10416987).

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
من 2 إلى 4 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
8 سنوات