SF188
Cell line · Product number 305870
The SF188 cell line is a human glioblastoma multiforme (GBM) model established from a pediatric patient. It is used extensively to study the mechanisms of...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים SF188 הוא מודל של גליובלסטומה מולטיפורמה (GBM) אנושית, שהוקם על בסיס דגימה שנלקחה מחולה ילדים. הוא משמש בהרחבה לחקר מנגנוני העמידות לכימותרפיה, במיוחד לחומרים אלקיליים כגון 1,3-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosourea (BCNU). בהשוואה לקווי תאים אחרים שמקורם בגליומה, כגון SF126, SF188 מפגין עמידות גבוהה משמעותית לרעילות התאית ולגנוטוקסיות הנגרמות על ידי BCNU. באופן ספציפי, SF188 מפגין עמידות גבוהה פי שלושה בערך במבחני הישרדות ורגישות נמוכה פי 14 לחילופי כרומטידות אחיות (SCE) המושרה על ידי BCNU, מה שמעיד על פנוטיפ חזק של סובלנות לנזק ל-DNA.
העמידות ב-SF188 מיוחסת ליכולת תיקון DNA משופרת, ובמיוחד להסרה מהירה ויעילה של תוצרי תגובה של O6-אלקילגואנין. בעת חשיפה לחומרים מתילנטים כגון N-מתיל-N-ניטרוסואוריאה, תאי SF188 מפגינים הסרה בולטת של נגעים מסוג O6-מתילגואנין, בעוד שקווי תאים רגישים יותר מפגינים פעילות תיקון מינימלית. תיקון נגעים יעיל זה מונע ככל הנראה היווצרות של קישורים צולבים בין-גדיליים, ובכך שומר על שלמות הגנום ומגביר את הישרדות התאים. חשוב לציין כי SF188 מציג גם ספירת כרומוזומים גבוהה (מספר מודאלי 91) וחסר ביטוי של החלבון החומצי הפיברילרי הגליאלי (GFAP), מה שמאשר את מקורו בגליומה בעלת הבחנה נמוכה והופך אותו למודל מצוין לחקר האינטראקציה בין תיקון ה-DNA לעמידות לכימותרפיה בגליומות בדרגה גבוהה.
- Tissue
- המוח, האונה הקדמית הימנית
- Disease
- גליובלסטומה
- Synonyms
- SF-188
- SF 188
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 26 שעות
04Identifiers
- Citation
- SF188 (מספר קטלוג Cytion 305870)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6948
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- מוטציה: TP53, פשוטה, p.Gly266Glu (c.797G>A), הומוזיגוטית (PubMed=9614553, PubMed=10416987).
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 2 עד 4 × 10⁴ תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 8 שנים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Disclaimer
- התאים שלנו מיועדים אך ורק למטרות מחקר במעבדה במבחנה, ואינם מיועדים לשימוש קליני או אבחוני, ולא מיועדים לטיפול בבני אדם או לשימוש וטרינרי. על המשתמשים להקפיד על כל ההנחיות והתקנות החלות על טיפול ושימוש בתאים אלה בסביבת מחקר.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
