Přejít na obsah
SF188
Tkáň
Mozek, pravý čelní lalok
Nemoc
Glioblastom
Synonyma
SF-188, SF 188

Dokumenty

SF188

Cell line · Číslo výrobku 305870

Buněčná linie SF188 je model lidského glioblastomu multiforme (GBM) odvozený od dětského pacienta. Široce se využívá ke studiu mechanismů...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie SF188 je model lidského glioblastomu multiforme (GBM) získaný od dětského pacienta. Je široce využívána ke studiu mechanismů rezistence na chemoterapii, zejména na alkylační činidla, jako je 1,3-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosomočovina (BCNU). Ve srovnání s jinými buněčnými liniemi odvozenými z gliomů, jako je SF126, vykazuje SF188 výrazně vyšší rezistenci vůči cytotoxicitě a genotoxicitě vyvolané BCNU. Konkrétně vykazuje SF188 přibližně trojnásobně vyšší rezistenci v testech přežití a 14krát nižší náchylnost k BCNU-indukované výměně sesterských chromatid (SCE), což naznačuje fenotyp s robustní tolerancí k poškození DNA.

Odolnost linie SF188 je připisována zvýšené schopnosti opravy DNA, zejména rychlému a účinnému odstraňování aduktů O6-alkylguaninu. Při expozici metylačním činidlům, jako je N-methyl-N-nitrosomočovina, vykazují buňky SF188 výrazné odstranění lézí O6-methylguaninu, zatímco citlivější buněčné linie vykazují minimální reparační aktivitu. Tato účinná oprava lézí pravděpodobně zabraňuje tvorbě mezireťazcových křížových vazeb, čímž udržuje genomovou integritu a zvyšuje přežití buněk. Důležité je, že SF188 vykazuje také vysoký počet chromozomů (modální počet 91) a postrádá expresi kyselého fibrilárního proteinu glií (GFAP), což potvrzuje jeho původ v málo diferencovaném gliomu a činí z něj vynikající model pro studium vzájemného působení mezi opravou DNA a chemorezistencí u vysoce maligních gliomů.

Tkáň
Mozek, pravý čelní lalok
Nemoc
Glioblastom
Synonyma
  • SF-188
  • SF 188

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Doba zdvojnásobení
26 hodin

04Identifikátory

Citace
SF188 (katalogové číslo Cytion 305870)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: TP53, jednoduchá, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozygotní (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 4 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
8 let