
- Audinys
- Smegenys, dešinysis priekinis skilvelis
- Liga
- Glioblastoma
- Sinonimai
- SF-188, SF 188
Dokumentai
SF188
Cell line · Prekės numeris 305870
SF188 ląstelių linija yra žmogaus daugiaformės glioblastomos (GBM) modelis, sukurtas remiantis vaikų ligonio mėginiais. Ji plačiai naudojama tyrinėjant mechanizmus...
Pritaikymas / Rekomendacijos
- SF188Cell line€800.00
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
01Bendra informacija
- Aprašymas
SF188 ląstelių linija yra žmogaus daugiaformės glioblastomos (GBM) modelis, sukurtas remiantis vaikų ligonio atveju. Ji plačiai naudojama chemoterapinio atsparumo mechanizmams tirti, ypač alkilinančių medžiagų, pvz., 1,3-bis(2-chloretil)-1-nitrozourea (BCNU), atžvilgiu. Palyginti su kitomis iš gliomos gautomis ląstelių linijomis, pvz., SF126, SF188 pasižymi žymiai didesniu atsparumu BCNU sukeltam citotoksiškumui ir genotoksiškumui. Konkrečiai, SF188 rodo maždaug tris kartus didesnį atsparumą išgyvenamumo tyrimuose ir 14 kartų mažesnį jautrumą BCNU sukeltam seserinių chromatidų mainui (SCE), o tai rodo stiprų DNR pažeidimų tolerancijos fenotipą.
SF188 atsparumas siejamas su sustiprintu DNR remonto pajėgumu, ypač su greitu ir veiksmingu O6-alkilguanino aduktų pašalinimu. Veikiant metilinantiems agentams, pavyzdžiui, N-metil-N-nitrozourea, SF188 ląstelės rodo ryškų O6-metilguanino pažeidimų pašalinimą, tuo tarpu jautresnės ląstelių linijos rodo minimalų remonto aktyvumą. Šis veiksmingas pažeidimų remontas tikriausiai užkerta kelią tarpgrandinių kryžminių ryšių susidarymui, taip išlaikydamas genomo vientisumą ir padidindamas ląstelių išgyvenimą. Svarbu paminėti, kad SF188 taip pat pasižymi dideliu chromosomų skaičiumi (modalinis skaičius – 91) ir jose neekspresuojamas glialinis fibriliarinis rūgštinis baltymas (GFAP), o tai patvirtina jos menkai diferencijuotą gliomos kilmę ir daro ją puikiu modeliu, skirtu tirti DNR remonto ir chemoresistentiškumo sąveiką aukšto laipsnio gliomose.
- Audinys
- Smegenys, dešinysis priekinis skilvelis
- Liga
- Glioblastoma
- Sinonimai
- SF-188
- SF 188
02Klasifikacija
- Organizmas
- Žmogus
- Seksas
- Vyras
- Augimo savybės
- Prisijungęs
- Biologinio saugumo lygis
- 1
03Charakteristikos
- Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
- 26 valandos
04Identifikatoriai
- Nuoroda
- SF188 (Cytion katalogo numeris 305870)
- NCBI mokesčių identifikavimo kodas
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6948
05Išraiška ir jautrumas
- Mutacijų profilis
- Mutacija: TP53, paprasta, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozigotinė (PubMed=9614553, PubMed=10416987).
06Laikymas ir auginimas
- Maitinamoji terpė
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
- Inkubacijos aplinka
37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.
- Maisto papildai
- Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
- Disociacijos reagentas
- Accutase
- Subkultūrinis auginimas
- Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
- Sėjos tankis
- 2–4 × 10⁴ ląstelių/cm²
- Skysčių atnaujinimas
- 2-3 kartus per savaitę
- Atšildymas ir auginimas
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas
- Sterilumas
Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.
Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.
- Šaldymo terpė
- Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
- Laikymo sąlygos
Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.
- Pristatymo sąlygos
Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.
08Donoras
- Donoro amžius
- 8 metai
09Teisiniai ir saugos klausimai
- Saugos priemonės
- Planuojant saugoti kriovaistinę skystame azote, kad ateityje ją būtų galima atšildyti, būtina laikytis griežtų saugos priemonių. Būtina mūvėti tinkamas apsaugines pirštines ir drabužius, o perkeliant užšaldytus mėginius į skystojo azoto talpyklą arba iš jos būtina naudoti veido kaukę arba apsauginius akinius. Taip siekiama sumažinti sužeidimų riziką dėl galimo kriokomponentų sprogimo išėmimo metu, kai gali išsiveržti aštrūs fragmentai.
- Atsakomybės apribojimas
- Mūsų ląstelės teikiamos tik in vitro laboratoriniams tyrimams ir nėra skirtos klinikiniam ar diagnostiniam naudojimui, jos taip pat nėra skirtos žmonėms ar naudojamos veterinarijos tikslais. Naudotojai privalo laikytis visų galiojančių rekomendacijų ir taisyklių, taikomų šių ląstelių tvarkymui ir naudojimui mokslinių tyrimų aplinkoje.
- Garantija
" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas
Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime
- Reikalinga medžiagų perdavimo sutartis
- Taip