Pereiti prie turinio
SF188
Audinys
Smegenys, dešinysis priekinis skilvelis
Liga
Glioblastoma
Sinonimai
SF-188, SF 188

Dokumentai

SF188

Cell line · Prekės numeris 305870

SF188 ląstelių linija yra žmogaus daugiaformės glioblastomos (GBM) modelis, sukurtas remiantis vaikų ligonio mėginiais. Ji plačiai naudojama tyrinėjant mechanizmus...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

SF188 ląstelių linija yra žmogaus daugiaformės glioblastomos (GBM) modelis, sukurtas remiantis vaikų ligonio atveju. Ji plačiai naudojama chemoterapinio atsparumo mechanizmams tirti, ypač alkilinančių medžiagų, pvz., 1,3-bis(2-chloretil)-1-nitrozourea (BCNU), atžvilgiu. Palyginti su kitomis iš gliomos gautomis ląstelių linijomis, pvz., SF126, SF188 pasižymi žymiai didesniu atsparumu BCNU sukeltam citotoksiškumui ir genotoksiškumui. Konkrečiai, SF188 rodo maždaug tris kartus didesnį atsparumą išgyvenamumo tyrimuose ir 14 kartų mažesnį jautrumą BCNU sukeltam seserinių chromatidų mainui (SCE), o tai rodo stiprų DNR pažeidimų tolerancijos fenotipą.

SF188 atsparumas siejamas su sustiprintu DNR remonto pajėgumu, ypač su greitu ir veiksmingu O6-alkilguanino aduktų pašalinimu. Veikiant metilinantiems agentams, pavyzdžiui, N-metil-N-nitrozourea, SF188 ląstelės rodo ryškų O6-metilguanino pažeidimų pašalinimą, tuo tarpu jautresnės ląstelių linijos rodo minimalų remonto aktyvumą. Šis veiksmingas pažeidimų remontas tikriausiai užkerta kelią tarpgrandinių kryžminių ryšių susidarymui, taip išlaikydamas genomo vientisumą ir padidindamas ląstelių išgyvenimą. Svarbu paminėti, kad SF188 taip pat pasižymi dideliu chromosomų skaičiumi (modalinis skaičius – 91) ir jose neekspresuojamas glialinis fibriliarinis rūgštinis baltymas (GFAP), o tai patvirtina jos menkai diferencijuotą gliomos kilmę ir daro ją puikiu modeliu, skirtu tirti DNR remonto ir chemoresistentiškumo sąveiką aukšto laipsnio gliomose.

Audinys
Smegenys, dešinysis priekinis skilvelis
Liga
Glioblastoma
Sinonimai
  • SF-188
  • SF 188

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
26 valandos

04Identifikatoriai

Nuoroda
SF188 (Cytion katalogo numeris 305870)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Išraiška ir jautrumas

Mutacijų profilis
Mutacija: TP53, paprasta, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozigotinė (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–4 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
8 metai