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SF188
ティッシュ
脳、右前頭葉
病気
膠芽腫
同義語
SF-188, SF 188

SF188

Cell line · 製品番号 305870

SF188細胞株は、小児患者から樹立されたヒト多形性膠芽腫(GBM)モデルである。これは、…のメカニズムを研究するために広く利用されている。

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01概要

説明

SF188細胞株は、小児患者から樹立されたヒト多形性膠芽腫(GBM)モデルである。 この細胞株は、化学療法耐性、特に1,3-ビス(2-クロロエチル)-1-ニトロソウレア(BCNU)などのアルキル化剤に対する耐性のメカニズムを研究するために広く利用されている。 SF126 などの他のグリオーマ由来の細胞株と比較して、SF188 は BCNU による細胞毒性および遺伝毒性に対して著しく高い耐性を示します。 具体的には、SF188 は生存率アッセイにおいて約 3 倍の耐性を示し、BCNU による姉妹染色分体交換(SCE)に対する感受性が 14 倍低いことから、強力な DNA 損傷耐性表現型であることが示されています。

SF188 の耐性は、DNA 修復能力の向上、特に O6-アルキルグアニン付加体の迅速かつ効率的な除去に起因すると考えられています。 N-メチル-N-ニトロソウレアのようなメチル化剤に曝露すると、SF188細胞はO6-メチルグアニン損傷の顕著な除去を示すのに対し、感受性の高い細胞株では修復活性はごくわずかである。この効率的な損傷修復により、鎖間架橋の形成が防止され、その結果、ゲノムの完全性が維持され、細胞の生存率が向上すると考えられる。 重要なことに、SF188は高い染色体数(最頻値91)を示し、グリア線維性酸性タンパク質(GFAP)の発現を欠いている。これは、その低分化型グリオーマ由来であることを裏付けており、高悪性度グリオーマにおけるDNA修復と化学療法耐性の相互作用を研究するための優れたモデルとなっている。

ティッシュ
脳、右前頭葉
病気
膠芽腫
同義語
  • SF-188
  • SF 188

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

倍増時間
26時間

04識別子

引用
SF188(Cytion カタログ番号 305870)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_6948

05発現と感受性

変異プロファイル
変異:TP53、単純変異、p.Gly266Glu (c.797G>A)、ホモ接合体(PubMed=9614553、PubMed=10416987)。

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
2~4 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
8年