Siirry sisältöön
SF188
Kudos
Aivot, oikea otsalohko
Sairaus
Glioblastooma
Synonyymit
SF-188, SF 188

Asiakirjat

SF188

Cell line · Tuotenumero 305870

SF188-solulinja on lapsipotilaasta kehitetty ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -malli. Sitä käytetään laajalti... mekanismien tutkimiseen

€800.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SF188-solulinja on lapsipotilaasta peräisin oleva ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -malli. Sitä käytetään laajasti kemoterapeuttisen resistenssin mekanismien tutkimiseen, erityisesti alkyloivien aineiden, kuten 1,3-bis(2-kloorietyyli)-1-nitrosourea (BCNU), osalta. Verrattuna muihin glioomasta peräisin oleviin solulinjoihin, kuten SF126:een, SF188 osoittaa huomattavasti suurempaa resistenssiä BCNU:n aiheuttamaa sytotoksisuutta ja genotoksisuutta vastaan. Tarkemmin sanottuna SF188 osoittaa noin kolminkertaista vastustuskykyä eloonjäämiskokeissa ja 14-kertaisesti pienempää alttiutta BCNU:n aiheuttamalle sisarkromatidien vaihtumiselle (SCE), mikä viittaa vahvaan DNA-vaurion sietokykyfenotyyppiin.

SF188:n resistenssi johtuu parantuneesta DNA:n korjauskyvystä, erityisesti O6-alkyyliguaniini-adduktien nopeasta ja tehokkaasta poistamisesta. Altistuessaan metyloiville aineille, kuten N-metyyli-N-nitrosourea, SF188-solut poistavat merkittävästi O6-metyyliguaniinivaurioita, kun taas herkimmät solulinjat osoittavat vain vähäistä korjausaktiivisuutta. Tämä tehokas vaurioiden korjaus estää todennäköisesti säikeiden välisten ristisidosten muodostumisen, mikä ylläpitää genomin eheyttä ja lisää solujen eloonjäämistä. Merkittävää on, että SF188-solulinjalla on myös suuri kromosomimäärä (modaaliluku 91) ja että siinä ei ilmenty gliafibrillaarista happamaa proteiinia (GFAP), mikä vahvistaa sen huonosti erilaistuneen gliooman alkuperän ja tekee siitä erinomaisen mallin korkea-asteisten glioomien DNA-korjauksen ja kemoresistenssin välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen.

Kudos
Aivot, oikea otsalohko
Sairaus
Glioblastooma
Synonyymit
  • SF-188
  • SF 188

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Kaksinkertaistumisaika
26 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
SF188 (Cytion-tuotenumero 305870)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Ilmentyminen ja alttius

Mutaatioprofiili
Mutaatio: TP53, yksinkertainen, p.Gly266Glu (c.797G>A), homotsygoottinen (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–4 × 10⁴ solua/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
8 vuotta