SF188
Cell line · Tuotenumero 305870
SF188-solulinja on lapsipotilaasta kehitetty ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -malli. Sitä käytetään laajalti... mekanismien tutkimiseen
Räätälöinti / Suositukset
- SF188Cell line€800.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
SF188-solulinja on lapsipotilaasta peräisin oleva ihmisen glioblastoma multiforme (GBM) -malli. Sitä käytetään laajasti kemoterapeuttisen resistenssin mekanismien tutkimiseen, erityisesti alkyloivien aineiden, kuten 1,3-bis(2-kloorietyyli)-1-nitrosourea (BCNU), osalta. Verrattuna muihin glioomasta peräisin oleviin solulinjoihin, kuten SF126:een, SF188 osoittaa huomattavasti suurempaa resistenssiä BCNU:n aiheuttamaa sytotoksisuutta ja genotoksisuutta vastaan. Tarkemmin sanottuna SF188 osoittaa noin kolminkertaista vastustuskykyä eloonjäämiskokeissa ja 14-kertaisesti pienempää alttiutta BCNU:n aiheuttamalle sisarkromatidien vaihtumiselle (SCE), mikä viittaa vahvaan DNA-vaurion sietokykyfenotyyppiin.
SF188:n resistenssi johtuu parantuneesta DNA:n korjauskyvystä, erityisesti O6-alkyyliguaniini-adduktien nopeasta ja tehokkaasta poistamisesta. Altistuessaan metyloiville aineille, kuten N-metyyli-N-nitrosourea, SF188-solut poistavat merkittävästi O6-metyyliguaniinivaurioita, kun taas herkimmät solulinjat osoittavat vain vähäistä korjausaktiivisuutta. Tämä tehokas vaurioiden korjaus estää todennäköisesti säikeiden välisten ristisidosten muodostumisen, mikä ylläpitää genomin eheyttä ja lisää solujen eloonjäämistä. Merkittävää on, että SF188-solulinjalla on myös suuri kromosomimäärä (modaaliluku 91) ja että siinä ei ilmenty gliafibrillaarista happamaa proteiinia (GFAP), mikä vahvistaa sen huonosti erilaistuneen gliooman alkuperän ja tekee siitä erinomaisen mallin korkea-asteisten glioomien DNA-korjauksen ja kemoresistenssin välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen.
- Kudos
- Aivot, oikea otsalohko
- Sairaus
- Glioblastooma
- Synonyymit
- SF-188
- SF 188
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Kaksinkertaistumisaika
- 26 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- SF188 (Cytion-tuotenumero 305870)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6948
05Ilmentyminen ja alttius
- Mutaatioprofiili
- Mutaatio: TP53, yksinkertainen, p.Gly266Glu (c.797G>A), homotsygoottinen (PubMed=9614553, PubMed=10416987).
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 2–4 × 10⁴ solua/cm²
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 8 vuotta
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Vastuuvapauslauseke
- Solujamme tarjotaan yksinomaan in vitro -laboratoriotutkimustarkoituksiin, eikä niitä ole tarkoitettu kliiniseen tai diagnostiseen käyttöön, eikä niitä saa antaa ihmisille tai käyttää eläinlääkinnällisiin tarkoituksiin. Käyttäjien on noudatettava kaikkia sovellettavia ohjeita ja määräyksiä, jotka koskevat näiden solujen käsittelyä ja käyttöä tutkimusympäristössä.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
