Skip to content
SF188
Tissue
สมอง, กลีบหน้าขวา
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Synonyms
SF-188, SF 188

Documents

SF188

Cell line · Product number 305870

The SF188 cell line is a human glioblastoma multiforme (GBM) model established from a pediatric patient. It is used extensively to study the mechanisms of...

€800.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ SF188 เป็นโมเดลของโรคกลีโอโบลาสโตมา มัลติฟอร์ม (GBM) ในมนุษย์ที่สร้างขึ้นจากผู้ป่วยเด็ก มันถูกใช้อย่างกว้างขวางเพื่อศึกษาการเกิดการต้านทานต่อเคมีบำบัด โดยเฉพาะอย่างยิ่งต่อสารอัลคิลเลติง เช่น 1,3-บิส(2-คลอโรเอทิล)-1-ไนโตรซูเรีย (BCNU) เมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ไลน์ที่มาจากเนื้องอกสมองชนิดกลีโอมาชนิดอื่น ๆ เช่น SF126 พบว่า SF188 มีความต้านทานต่อความเป็นพิษต่อเซลล์และการก่อกลายพันธุ์ที่เกิดจาก BCNU สูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง SF188 แสดงความต้านทานที่มากกว่าประมาณสามเท่าในการทดสอบการอยู่รอดและมีความไวต่อ BCNU-induced sister chromatid exchange (SCE) ต่ำกว่า 14 เท่า ซึ่งบ่งชี้ถึงลักษณะการทนทานต่อความเสียหายของดีเอ็นเอที่แข็งแกร่ง

ความต้านทานใน SF188 เกิดจากความสามารถในการซ่อมแซมดีเอ็นเอที่เพิ่มขึ้น โดยเฉพาะการกำจัดสารประกอบ O6-alkylguanine ได้อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพ เมื่อสัมผัสกับสารเมทิลเลต เช่น เอ็น-เมทิล-เอ็น-ไนโตรซออูเรีย เซลล์ SF188 จะแสดงการกำจัดรอยโรค O6-เมทิลกัวอีนีนอย่างเด่นชัด ในขณะที่สายพันธุ์เซลล์ที่มีความไวมากกว่าจะแสดงกิจกรรมการซ่อมแซมเพียงเล็กน้อย การซ่อมแซมรอยโรคที่มีประสิทธิภาพนี้อาจป้องกันการเกิดการเชื่อมโยงข้ามสายดีเอ็นเอ ส่งผลให้คงความสมบูรณ์ของจีโนมและเพิ่มอัตราการรอดชีวิตของเซลล์ ที่สำคัญ SF188 ยังแสดงจำนวนโครโมโซมสูง (จำนวนสูงสุด 91) และไม่มีการแสดงออกของโปรตีน glial fibrillary acidic protein (GFAP) ซึ่งยืนยันถึงต้นกำเนิดของเนื้องอกสมองชนิด glioma ที่มีการแยกตัวต่ำ และทำให้เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างการซ่อมแซม DNA และการดื้อยาเคมีบำบัดในเนื้องอกสมองชนิดสูง

Tissue
สมอง, กลีบหน้าขวา
Disease
กลิโอบลาสโตมา
Synonyms
  • SF-188
  • SF 188

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
26 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
SF188 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305870)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: TP53, แบบง่าย, p.Gly266Glu (c.797G>A), ชนิดโฮโมไซโกต (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
8 ปี