
- Tissue
- Cerebro, lóbulo frontal derecho
- Disease
- Glioblastoma
- Synonyms
- SF-188, SF 188
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SF188
Cell line · Product number 305870
The SF188 cell line is a human glioblastoma multiforme (GBM) model established from a pediatric patient. It is used extensively to study the mechanisms of...
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01General information
- Description
La línea celular SF188 es un modelo de glioblastoma multiforme (GBM) humano establecido a partir de un paciente pediátrico. Se utiliza ampliamente para estudiar los mecanismos de resistencia a la quimioterapia, particularmente a los agentes alquilantes como la 1,3-bis(2-cloroetil)-1-nitrosourea (BCNU). En comparación con otras líneas celulares derivadas de gliomas, como la SF126, la SF188 presenta una resistencia significativamente mayor a la citotoxicidad y genotoxicidad inducidas por el BCNU. Específicamente, la SF188 muestra una resistencia aproximadamente tres veces mayor en ensayos de supervivencia y una susceptibilidad 14 veces menor al intercambio de cromátidas hermanas (SCE) inducido por el BCNU, lo que indica un fenotipo robusto de tolerancia al daño en el ADN.
La resistencia de la SF188 se atribuye a una mayor capacidad de reparación del ADN, especialmente a la eliminación rápida y eficiente de los aductos de O6-alquilguanina. Tras la exposición a agentes metilantes como la N-metil-N-nitrosourea, las células SF188 demuestran una eliminación notable de las lesiones de O6-metilguanina, mientras que las líneas celulares más sensibles muestran una actividad de reparación mínima. Es probable que esta reparación eficiente de las lesiones prevenga la formación de enlaces cruzados entre cadenas, lo que mantiene la integridad genómica y aumenta la supervivencia celular. Es importante destacar que la SF188 también presenta un alto recuento cromosómico (número modal de 91) y carece de expresión de la proteína ácida fibrilar glial (GFAP), lo que confirma su origen en un glioma poco diferenciado y la convierte en un excelente modelo para estudiar la interacción entre la reparación del ADN y la quimiorresistencia en los gliomas de alto grado.
- Tissue
- Cerebro, lóbulo frontal derecho
- Disease
- Glioblastoma
- Synonyms
- SF-188
- SF 188
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 26 horas
04Identifiers
- Citation
- SF188 (número de catálogo de Cytion 305870)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6948
05Expression and susceptibility
- Mutational profile
- Mutación: TP53, simple, p.Gly266Glu (c.797G>A), homocigótica (PubMed=9614553, PubMed=10416987).
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), con: 2 mM de L-glutamina, con: 2,2 g/L de NaHCO₃, con: EBSS (número de artículo de Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.
- Supplements
- Añade al medio un 10 % de FBS y un 1 % de NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
- Seeding density
- De 2 a 4 × 10⁴ células/cm²
- Fluid renewal
- De 2 a 3 veces por semana
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.
Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.
- Freeze medium
- Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
- Storage conditions
Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.
- Shipping conditions
Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.
08Donor
- Donor age
- 8 años
09Legal and safety
- Safety precautions
- Cuando se planea almacenar un criovial en nitrógeno líquido para su descongelación futura, es obligatorio cumplir con estrictas medidas de seguridad. Es esencial contar con guantes y ropa de protección adecuados, y se requiere el uso de una mascarilla o lentes de seguridad durante la transferencia de muestras congeladas hacia o desde el tanque de nitrógeno líquido. Esto tiene como objetivo mitigar el riesgo de lesiones por posibles explosiones de los criotubos al retirarlos, lo que puede provocar la proyección de fragmentos afilados.
- Disclaimer
- Nuestras células se proporcionan exclusivamente con fines de investigación de laboratorio in vitro y no están destinadas a uso clínico ni diagnóstico, ni deben administrarse a seres humanos ni utilizarse con fines veterinarios. Los usuarios deben cumplir con todas las directrices y regulaciones aplicables para la manipulación y el uso de estas células en un entorno de investigación.
- Warranty
En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.
Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.
- Material Transfer Agreement required
- Yes