Gå direkte til indholdet
SF188
Væv
Hjernen, højre frontallap
Sygdom
Glioblastom
Synonymer
SF-188, SF 188

Dokumenter

SF188

Cell line · Varenummer 305870

SF188-cellelinjen er en model for humant glioblastoma multiforme (GBM), der er etableret ud fra en pædiatrisk patient. Den anvendes i vid udstrækning til at undersøge mekanismerne bag...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

SF188-cellelinjen er en model for humant glioblastoma multiforme (GBM), der er etableret ud fra en pædiatrisk patient. Den anvendes i vid udstrækning til at undersøge mekanismerne bag kemoterapeutisk resistens, især over for alkyleringsmidler såsom 1,3-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosourea (BCNU). Sammenlignet med andre gliom-afledte cellelinjer såsom SF126 udviser SF188 en signifikant højere resistens over for BCNU-induceret cytotoksicitet og genotoksicitet. Mere specifikt udviser SF188 en ca. tredobbelt større resistens i overlevelsesassays og en 14 gange lavere følsomhed over for BCNU-induceret søsterkromatidudveksling (SCE), hvilket indikerer en robust fænotype med hensyn til tolerance over for DNA-skader.

Resistensen i SF188 tilskrives en forbedret DNA-reparationskapacitet, især den hurtige og effektive fjernelse af O6-alkylguanin-addukter. Ved eksponering for metyleringsmidler som N-methyl-N-nitrosourea udviser SF188-celler en markant fjernelse af O6-methylguanin-læsioner, mens mere følsomme cellelinjer kun viser minimal reparationsaktivitet. Denne effektive læsionsreparation forhindrer sandsynligvis dannelsen af tværbindinger mellem DNA-strengene, hvilket dermed opretholder den genomiske integritet og øger cellernes overlevelse. Vigtigt er det, at SF188 også udviser et højt kromosomantal (modalt antal 91) og mangler ekspression af glialfibrillært surt protein (GFAP), hvilket bekræfter dets dårligt differentierede gliomoprindelse og gør det til en fremragende model til at studere samspillet mellem DNA-reparation og kemoresistens i højgradige gliomer.

Væv
Hjernen, højre frontallap
Sygdom
Glioblastom
Synonymer
  • SF-188
  • SF 188

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Fordoblingstid
26 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SF188 (Cytion-katalognummer 305870)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6948

05Udtryk og modtagelighed

Mutationsprofil
Mutation: TP53, enkel, p.Gly266Glu (c.797G>A), homozygot (PubMed=9614553, PubMed=10416987).

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 til 4 × 10⁴ celler/cm²
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
8 år