SF188

A linhagem celular SF188 é um modelo de glioblastoma multiforme (GBM) humano estabelecido a partir de um paciente pediátrico. Ela é amplamente utilizada para estudar os mecanismos de resistência à quimioterapia, particularmente a agentes alquilantes, como a 1,3-bis(2-cloroetil)-1-nitrosoureia (BCNU). Em comparação com outras linhagens celulares derivadas de glioma, como a SF126, a SF188 apresenta resistência significativamente maior à citotoxicidade e genotoxicidade induzidas pelo BCNU. Especificamente, a SF188 apresenta resistência aproximadamente três vezes maior em ensaios de sobrevivência e suscetibilidade 14 vezes menor à troca de cromátides irmãs (SCE) induzida pelo BCNU, indicando um fenótipo robusto de tolerância a danos no DNA.

A resistência da SF188 é atribuída à capacidade aprimorada de reparo do DNA, especialmente à remoção rápida e eficiente de adutos de O⁶-^alquilguanina. Após exposição a agentes metilantes como a N-metil-N-nitrosoureia, as células SF188 demonstram remoção acentuada de lesões de O⁶-metilguanina, enquanto linhagens celulares mais sensíveis apresentam atividade de reparo mínima. Esse reparo eficiente das lesões provavelmente impede a formação de ligações cruzadas entre as fitas, mantendo assim a integridade genômica e aumentando a sobrevivência celular. É importante ressaltar que a SF188 também apresenta uma alta contagem cromossômica (número modal 91) e não expressa a proteína ácida fibrilar glial (GFAP), o que confirma sua origem em glioma pouco diferenciado e a torna um excelente modelo para o estudo da interação entre o reparo do DNA e a quimiorresistência em gliomas de alto grau.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.