SK-NEP-1

SK-NEP-1 est une lignée cellulaire humaine issue à l’origine d’un néphroblastome, également connu sous le nom de tumeur de Wilms, une tumeur maligne rénale courante chez l’enfant. Cette lignée cellulaire a été largement utilisée dans la recherche préclinique pour étudier la biologie du néphroblastome et évaluer de nouvelles approches thérapeutiques pour le traitement de la tumeur de Wilms. Cependant, des caractérisations moléculaires ultérieures ont révélé que SK-NEP-1 exprime le gène de fusion EWS-FLI1, caractéristique du sarcome d’Ewing, ce qui indique que cette lignée cellulaire est plus représentative de la famille des tumeurs d’Ewing que de la tumeur de Wilms. Cette découverte a des implications importantes pour l’interprétation des recherches antérieures ayant utilisé la lignée SK-NEP-1, car ses caractéristiques biologiques correspondent davantage à celles du sarcome d’Ewing qu’à celles de la tumeur de Wilms anaplasique.

Les recherches menées sur la lignée SK-NEP-1 ont montré qu’elle est sensible aux agents chimiothérapeutiques tels que la vincristine, qui inhibe la polymérisation des microtubules, entraînant un arrêt en phase G2/M et l’apoptose. De plus, les thérapies combinées utilisant des composés naturels comme l’andrographolide ont démontré des effets synergiques en augmentant la cytotoxicité de la vincristine sur les cellules SK-NEP-1, principalement par l’intermédiaire de la voie de signalisation PI3K-AKT-p53. Il a été démontré que cette association induisait l’apoptose dans les cellules SK-NEP-1, tant in vitro qu’in vivo, ce qui en fait une approche prometteuse pour le traitement des tumeurs présentant les mêmes caractéristiques moléculaires que la lignée SK-NEP-1.

La lignée SK-NEP-1 constitue donc un modèle essentiel pour l’étude des fondements moléculaires des tumeurs rénales pédiatriques et des sarcomes d’Ewing, ainsi que pour l’évaluation de l’efficacité des combinaisons de médicaments visant à améliorer les résultats thérapeutiques dans ces types de cancer. Son utilisation dans la recherche a contribué à la compréhension de l’apoptose induite par les médicaments et au potentiel du ciblage de voies de signalisation spécifiques telles que PI3K-AKT-p53 dans le traitement du cancer.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.