Gå til innholdet
SK-NEP-1
Vev
Nyre
Sykdom
Wilms-svulst
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Dokumenter

SK-NEP-1

Cell line · Produktnummer 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

SK-NEP-1 er en human cellelinje som opprinnelig stammer fra et nefroblastom, også kjent som Wilms' tumor, en vanlig malignitet i nyrene hos barn. Denne cellelinjen har blitt brukt i utstrakt grad i preklinisk forskning for å studere nefroblastomets biologi og for å evaluere nye behandlingsmetoder for Wilms' svulst. Senere molekylære karakteriseringer har imidlertid avdekket at SK-NEP-1 uttrykker fusjonsgenet EWS-FLI1, som er karakteristisk for Ewing-sarkom, noe som indikerer at denne cellelinjen er mer representativ for Ewing-familien av svulster enn for Wilms' svulst. Denne oppdagelsen har viktige implikasjoner for tolkningen av tidligere forskning som har benyttet SK-NEP-1, ettersom cellelinjens biologiske egenskaper stemmer bedre overens med Ewing-sarkom enn med anaplastisk Wilms' tumor.

Forskning på SK-NEP-1 har vist at den reagerer på cellegift som vincristin, som hemmer mikrotubulipolymerisering, noe som fører til G2/M-fasestans og apoptose. I tillegg har kombinasjonsbehandlinger med naturlige forbindelser som andrografolid vist seg å ha en synergistisk effekt når det gjelder å øke cytotoksisiteten av vinkristin på SK-NEP-1-celler, primært gjennom PI3K-AKT-p53-signalveien. Denne kombinasjonen har vist seg å indusere apoptose i SK-NEP-1-celler, både in vitro og in vivo, noe som gjør den til en lovende tilnærming til behandling av svulster som deler de molekylære egenskapene til SK-NEP-1.

SK-NEP-1 er dermed en viktig modell for å studere de molekylære forutsetningene for nyre- og Ewing-sarkomsvulster hos barn, og for å evaluere effekten av kombinasjoner av legemidler som kan forbedre behandlingsresultatene for disse krefttypene. Bruken av den i forskning har bidratt til å forstå medikamentindusert apoptose og potensialet i å målrette kreftbehandling mot spesifikke signalveier som PI3K-AKT-p53.

Vev
Nyre
Sykdom
Wilms-svulst
Metastaseområde
Pleuraeffusjon
Synonymer
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorinduserende
Ja, i nakne mus.
Karyotype
(P12) hypotriploid til hypertriploid (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) med abnormaliteter som akrocentriske fragmenter, sekundære innsnevringer og store subtelosentriske markører

04Identifikatorer

Kildehenvisning
SK-NEP-1 (Cytion katalognummer 300341)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Uttrykk og mottakelighet

Isoenzymer
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotypefrekvensprodukt: 0.0029
Mutasjonsprofil
P53 mut

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
McCoys 5a, m: 3,0 g/L glukose, m: stabil glutamin, m: 2,0 mM natriumpyruvat, m: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820200a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
25 år
Etnisitet
Kaukasisk