Mine otse sisu juurde
SK-NEP-1
Kude
Neerud
Haigus
Wilmsi kasvaja
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Dokumendid

SK-NEP-1

Cell line · Toote number 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

SK-NEP-1 on inimese rakuliin, mis on algselt saadud nefroblastoomist, tuntud ka kui Wilmsi kasvaja, mis on levinud laste pahaloomuline neerukahjustus. Seda rakuliini on laialdaselt kasutatud prekliinilistes uuringutes nefroblastoomi bioloogia uurimiseks ja Wilmsi kasvaja raviks kasutatavate uute ravimeetodite hindamiseks. Hilisemad molekulaarsed iseloomustused näitasid siiski, et SK-NEP-1 ekspresseerib EWS-FLI1 fusioonigeeni, mis on iseloomulik Ewingi sarkoomile, mis näitab, et see rakuliin esindab pigem Ewingi kasvajate perekonda kui Wilmsi kasvaja. See avastus mõjutab oluliselt varasemate SK-NEP-1 kasutanud uuringute tõlgendamist, kuna selle bioloogilised omadused on pigem Ewingi sarkoomi kui anaplastilise Wilmsi kasvaja omadustega kooskõlas.

SK-NEP-1-ga seotud uuringud on näidanud, et see reageerib kemoteraapia ainetele, nagu vinkristiin, mis inhibeerib mikrotuubulite polümerisatsiooni, mis viib G2/M faasi peatumiseni ja apoptoosini. Lisaks on kombinatsiooniteraapia, milles kasutatakse looduslikke ühendeid, nagu andrografoliid, näidanud sünergilist mõju vinkristiini tsütotoksilisuse suurendamisel SK-NEP-1 rakkudele, peamiselt PI3K-AKT-p53 signaalitee kaudu. On näidatud, et see kombinatsioon kutsub SK-NEP-1 rakkudes esile apoptoosi nii in vitro kui ka in vivo, mistõttu on see paljulubav lähenemisviis SK-NEP-1 molekulaarseid omadusi omavate kasvajate raviks.

SK-NEP-1 on seega kriitiline mudel pediaatriliste neeru- ja Ewingi sarkoomi kasvajate molekulaarsete aluste uurimiseks ning nende vähitüüpide ravitulemuste parandamiseks mõeldud ravimikombinatsioonide tõhususe hindamiseks. Selle kasutamine teadusuuringutes on aidanud mõista ravimitest põhjustatud apoptoosi ja konkreetsete signaaliradade, nagu PI3K-AKT-p53, sihtmärgi potentsiaali vähiravis.

Kude
Neerud
Haigus
Wilmsi kasvaja
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, alasti hiirtel.
Karyotüüp
(P12) hüpotriploidne kuni hüpertriploidne (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G), millel on kõrvalekalded, sealhulgas akrotsentrilised fragmendid, sekundaarsed ahenemised ja suured subtelotsentrilised markerid

04Tunnused

Viide
SK-NEP-1 (Cytioni katalooginumber 300341)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, fenotüübi sagedustoode: 0.0029
Mutatsiooniprofiil
P53 mut

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glükoos, w: stabiilne glutamiin, w: 2,0 mM naatriumpüruvaat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820200a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
25 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia