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SK-NEP-1
ティッシュ
腎臓
病気
ウィルムス腫瘍
転移部位
胸水
同義語
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

SK-NEP-1

Cell line · 製品番号 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

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01概要

説明

SK-NEP-1は、一般的な小児腎悪性腫瘍であるウィルムス腫瘍としても知られる腎芽腫に由来するヒト細胞株である。この細胞株は、腎芽細胞腫の生物学を研究し、ウィルムス腫瘍を治療するための新しい治療法を評価するための前臨床研究に広く用いられてきた。しかし、その後の分子生物学的解析により、SK-NEP-1はユーイング肉腫に特徴的なEWS-FLI1融合遺伝子を発現していることが明らかになり、この細胞株はウィルムス腫瘍というよりもむしろユーイングファミリーの代表的な腫瘍であることが示された。この発見は、SK-NEP-1の生物学的特徴がウィルムス未分化腫瘍よりもむしろユーイング肉腫に近いことから、SK-NEP-1を利用した過去の研究を解釈する上で重要な意味を持つ。

SK-NEP-1を用いた研究では、微小管の重合を阻害し、G2/M期の停止とアポトーシスをもたらすビンクリスチンなどの化学療法剤に反応することが示されている。さらに、アンドログラフォリドのような天然化合物を用いた併用療法は、主にPI3K-ACT-p53シグナル伝達経路を介して、SK-NEP-1細胞に対するビンクリスチンの細胞毒性を増強する相乗効果を示した。この併用療法は、in vitroとin vivoの両方でSK-NEP-1細胞にアポトーシスを誘導することが示され、SK-NEP-1と分子的特徴を共有する腫瘍の治療に有望なアプローチとなった。

このようにSK-NEP-1は、小児腎腫瘍やユーイング肉腫の分子基盤を研究し、これらのがん種の治療成績を改善することを目的とした薬剤併用療法の有効性を評価するための重要なモデルである。SK-NEP-1の研究利用は、薬剤誘発アポトーシスや、がん治療におけるPI3K-ACT-p53のような特定のシグナル伝達経路を標的とする可能性の理解に貢献している。

ティッシュ
腎臓
病気
ウィルムス腫瘍
転移部位
胸水
同義語
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
サスペンション
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、ヌードマウスで。
核型
(P12)半倍数体から倍数体(+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G)で、先端核断片、二次収縮、大きな亜テロセントリックマーカーなどの異常がある。

04識別子

引用
SK-NEP-1 (Cytion カタログ番号 300341)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0631

05発現と感受性

アイソザイム
PGM3、1、PGM1、1-2、ES-D、1、Me-2、2、AK-1、1、GLO-1、2、G6PD、B、表現型頻度積: 0.0029
変異プロファイル
P53変異体

06取り扱いと飼育

培地
McCoys 5a、w:3.0g/L グルコース、w:安定グルタミン、w:2.0mM ピルビン酸ナトリウム、w:2.2g/L NaHCO3 (Cytion article number 820200a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
継代培養
培地を定期的に追加または交換して培養を維持する。培養開始時の細胞密度は5×10⁵細胞/mlとし、最適な増殖のため細胞濃度を3×10⁵~1×10⁶細胞/mlの範囲に保つ。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
25年
民族
白人