Skip to content
SK-NEP-1
Tissue
ไต
Disease
เนื้องอกวิลส์
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Documents

SK-NEP-1

Cell line · Product number 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

SK-NEP-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์มนุษย์ที่ได้มาจากเนื้องอกไตในเด็ก (nephroblastoma) หรือที่รู้จักกันในชื่อเนื้องอกวิลม์ส (Wilms' tumor) ซึ่งเป็นมะเร็งไตที่พบได้บ่อยในเด็ก สายพันธุ์เซลล์นี้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในงานวิจัยก่อนคลินิกเพื่อศึกษาชีววิทยาของเนื้องอกไตในเด็กและประเมินแนวทางการรักษาใหม่ ๆ สำหรับการรักษามะเร็งวิลม์สอย่างไรก็ตาม การวิเคราะห์ลักษณะทางโมเลกุลในภายหลังได้เปิดเผยว่า SK-NEP-1 แสดงยีนฟิวชั่น EWS-FLI1 ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของมะเร็งอีวิง แสดงให้เห็นว่าสายเซลล์นี้เป็นตัวแทนของกลุ่มเนื้องอกอีวิงมากกว่าเนื้องอกวิล姆斯 การค้นพบนี้มีความสำคัญต่อการตีความงานวิจัยที่ผ่านมาที่ใช้ SK-NEP-1 เนื่องจากลักษณะทางชีวภาพของมันสอดคล้องกับมะเร็งอีวิงมากกว่าเนื้องอกวิล姆斯ชนิดแอนาพลาสติก

งานวิจัยที่เกี่ยวข้องกับ SK-NEP-1 แสดงให้เห็นว่าเซลล์ชนิดนี้ตอบสนองต่อยาเคมีบำบัด เช่น วินคริสทีน ซึ่งยับยั้งการรวมตัวของไมโครทูบูล ส่งผลให้เกิดการหยุดแบ่งเซลล์ที่ระยะ G2/M และเกิดกระบวนการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสนอกจากนี้ การบำบัดแบบผสมผสานโดยใช้สารประกอบธรรมชาติ เช่น แอนโดรกราโฟไลด์ ได้แสดงให้เห็นถึงผลเสริมฤทธิ์ในการเพิ่มความเป็นพิษต่อเซลล์ของวินคริสทีนต่อเซลล์ SK-NEP-1 โดยหลักผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K-AKT-p53 การผสมผสานนี้แสดงให้เห็นว่าสามารถเหนี่ยวนำให้เกิดการตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสในเซลล์ SK-NEP-1 ทั้งในหลอดทดลองและในสิ่งมีชีวิต ทำให้เป็นแนวทางที่มีศักยภาพในการรักษามะเร็งที่มีลักษณะทางโมเลกุลคล้ายกับ SK-NEP-1

SK-NEP-1 จึงเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาพื้นฐานทางโมเลกุลของเนื้องอกไตและซาร์โคมาของอีวิงในเด็ก และสำหรับการประเมินประสิทธิภาพของการใช้ยาหลายชนิดร่วมกันเพื่อปรับปรุงผลลัพธ์การรักษาในมะเร็งชนิดนี้ การใช้แบบจำลองนี้ในงานวิจัยได้ช่วยให้เข้าใจการตายของเซลล์ที่เกิดจากยา (apoptosis) และศักยภาพของการมุ่งเป้าไปที่เส้นทางสัญญาณเฉพาะ เช่น PI3K-AKT-p53 ในการรักษาโรคมะเร็ง

Tissue
ไต
Disease
เนื้องอกวิลส์
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน
Karyotype
(P12) มีจำนวนโครโมโซม 3 ชุดครึ่งถึง 4 ชุด (มีโครโมโซม A1, A2, C, D, E, F, G เพิ่มเติม) พร้อมความผิดปกติรวมถึงชิ้นส่วนที่มีโครโมโซมปลายแขนเดียว (acrocentric fragments), การมีวงแหวนรัดรอง (secondary constrictions) และเครื่องหมายย่อยที่ปลายแขนโครโมโซมขนาดใหญ่ (large sub telocentric markers)

04Identifiers

Citation
SK-NEP-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300341)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, ความถี่ของฟีโนไทป์: 0.0029
Mutational profile
การกลายพันธุ์ของ P53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: เสถียร กลูตามีน, w: 2.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 2.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Subculturing
รักษาวัฒนธรรมโดยการเติมหรือเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเชื้อเป็นระยะๆ เริ่มต้นวัฒนธรรมด้วยความหนาแน่น 5 x 105 เซลล์/มล. และรักษาความเข้มข้นของเซลล์ให้อยู่ในช่วง 3 x 105 ถึง 1 x 106 เซลล์/มล. เพื่อการเจริญเติบโตที่ดีที่สุด
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
25 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน