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SK-NEP-1
Gewebe
Niere
Krankheit
Wilms-Tumor
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

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SK-NEP-1

Cell line · Artikelnummer 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

SK-NEP-1 ist eine menschliche Zelllinie, die ursprünglich von einem Nephroblastom, auch Wilms-Tumor genannt, einer häufigen pädiatrischen Nierenerkrankung, stammt. Diese Zelllinie wurde in der präklinischen Forschung ausgiebig verwendet, um die Biologie des Nephroblastoms zu untersuchen und neue therapeutische Ansätze zur Behandlung des Wilms-Tumors zu testen. Spätere molekulare Charakterisierungen ergaben jedoch, dass SK-NEP-1 das EWS-FLI1-Fusionsgen exprimiert, das für das Ewing-Sarkom charakteristisch ist, was darauf hindeutet, dass diese Zelllinie eher für die Ewing-Tumorfamilie als für den Wilms-Tumor repräsentativ ist. Diese Entdeckung hat wichtige Auswirkungen auf die Interpretation früherer Forschungsarbeiten, bei denen SK-NEP-1 verwendet wurde, da seine biologischen Merkmale eher mit dem Ewing-Sarkom als mit dem anaplastischen Wilms-Tumor übereinstimmen.

Die Forschung mit SK-NEP-1 hat gezeigt, dass es auf Chemotherapeutika wie Vincristin anspricht, das die Mikrotubuli-Polymerisation hemmt, was zu einem Stillstand der G2/M-Phase und Apoptose führt. Darüber hinaus haben Kombinationstherapien mit Naturstoffen wie Andrographolid synergistische Effekte bei der Erhöhung der Zytotoxizität von Vincristin auf SK-NEP-1-Zellen gezeigt, und zwar in erster Linie über den PI3K-AKT-p53-Signalweg. Es wurde gezeigt, dass diese Kombination sowohl in vitro als auch in vivo die Apoptose in SK-NEP-1-Zellen auslöst, was sie zu einem vielversprechenden Ansatz für die Behandlung von Tumoren macht, die die molekularen Merkmale von SK-NEP-1 aufweisen.

SK-NEP-1 ist daher ein wichtiges Modell für die Untersuchung der molekularen Grundlagen von pädiatrischen Nieren- und Ewing-Sarkom-Tumoren und für die Bewertung der Wirksamkeit von Arzneimittelkombinationen, die die therapeutischen Ergebnisse bei diesen Krebsarten verbessern sollen. Seine Verwendung in der Forschung hat zum Verständnis der medikamenteninduzierten Apoptose und des Potenzials der gezielten Beeinflussung bestimmter Signalwege wie PI3K-AKT-p53 in der Krebstherapie beigetragen.

Gewebe
Niere
Krankheit
Wilms-Tumor
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Ja, an nackten Mäusen.
Karyotyp
(P12) hypotriploid bis hypertriploid (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) mit Anomalien wie akrozentrischen Fragmenten, sekundären Einschnürungen und großen subtelozentrischen Markern

04Bezeichner

Quellenangabe
SK-NEP-1 (Cytion-Katalognummer 300341)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Phänotyp-Häufigkeitsprodukt: 0.0029
Mutationsprofil
P53 mutiert

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiles Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820200a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
25 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch