SK-NEP-1

SK-NEP-1 je lidská buněčná linie původně odvozená z nefroblastomu, známého také jako Wilmsův nádor, což je časté zhoubné onemocnění ledvin u dětí. Tato buněčná linie byla hojně využívána v preklinickém výzkumu ke studiu biologie nefroblastomu a k hodnocení nových terapeutických přístupů k léčbě Wilmsova nádoru. Pozdější molekulární charakterizace však odhalila, že SK-NEP-1 exprimuje fúzní gen EWS-FLI1, který je charakteristický pro Ewingův sarkom, což naznačuje, že tato buněčná linie je spíše zástupcem rodiny Ewingových nádorů než Wilmsova nádoru. Tento objev má důležité důsledky pro interpretaci dřívějších výzkumů, které využívaly SK-NEP-1, protože její biologické charakteristiky odpovídají spíše Ewingovu sarkomu než anaplastickému Wilmsovu nádoru.

Výzkum SK-NEP-1 ukázal, že reaguje na chemoterapeutika, jako je vinkristin, který inhibuje polymerizaci mikrotubulů, což vede k zástavě G2/M fáze a apoptóze. Kombinovaná terapie využívající přírodní sloučeniny, jako je andrografolid, navíc prokázala synergické účinky při zvyšování cytotoxicity vinkristinu na buňky SK-NEP-1, především prostřednictvím signální dráhy PI3K-AKT-p53. Ukázalo se, že tato kombinace vyvolává apoptózu v buňkách SK-NEP-1, a to jak in vitro, tak in vivo, což z ní činí slibný přístup k léčbě nádorů, které mají stejné molekulární charakteristiky jako SK-NEP-1.

SK-NEP-1 je tedy kritickým modelem pro studium molekulárních základů dětských nádorů ledvin a Ewingova sarkomu a pro hodnocení účinnosti kombinací léčiv zaměřených na zlepšení léčebných výsledků u těchto typů nádorů. Jeho využití ve výzkumu přispělo k pochopení apoptózy vyvolané léky a potenciálu cílení na specifické signální dráhy, jako je PI3K-AKT-p53, při léčbě rakoviny.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení