Prejsť na obsah
SK-NEP-1
Tkanivo
Obličky
Choroba
Wilmsov nádor
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Dokumenty

SK-NEP-1

Cell line · Číslo výrobku 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

SK-NEP-1 je ľudská bunková línia pôvodne odvodená z nefroblastómu, známeho aj ako Wilmsov nádor, ktorý je bežným detským malígnym ochorením obličiek. Táto bunková línia sa vo veľkej miere používa v predklinickom výskume na štúdium biológie nefroblastómu a na hodnotenie nových terapeutických prístupov na liečbu Wilmsovho nádoru. Neskoršie molekulárne charakteristiky však odhalili, že SK-NEP-1 exprimuje fúzny gén EWS-FLI1, ktorý je charakteristický pre Ewingov sarkóm, čo naznačuje, že táto bunková línia je skôr zástupcom Ewingovej rodiny nádorov než Wilmsovho nádoru. Tento objav má dôležitý význam pre interpretáciu doterajšieho výskumu, v ktorom sa využíval SK-NEP-1, keďže jeho biologické vlastnosti sa viac približujú Ewingovmu sarkómu než anaplastickému Wilmsovmu nádoru.

Výskum SK-NEP-1 ukázal, že reaguje na chemoterapeutiká, ako je vinkristín, ktorý inhibuje polymerizáciu mikrotubulov, čo vedie k zastaveniu G2/M fázy a apoptóze. Okrem toho kombinované terapie využívajúce prírodné zlúčeniny, ako je andrografolyd, preukázali synergické účinky pri zvyšovaní cytotoxicity vinkristínu na bunky SK-NEP-1, predovšetkým prostredníctvom signálnej dráhy PI3K-AKT-p53. Ukázalo sa, že táto kombinácia indukuje apoptózu v bunkách SK-NEP-1 in vitro aj in vivo, čo z nej robí sľubný prístup na liečbu nádorov, ktoré majú rovnaké molekulárne charakteristiky ako SK-NEP-1.

SK-NEP-1 je teda rozhodujúcim modelom na štúdium molekulárnych základov nádorov detských obličiek a Ewingovho sarkómu a na hodnotenie účinnosti kombinácií liekov zameraných na zlepšenie terapeutických výsledkov u týchto typov rakoviny. Jeho použitie vo výskume prispelo k pochopeniu apoptózy vyvolanej liekmi a potenciálu zamerania sa na špecifické signálne dráhy, ako je PI3K-AKT-p53, pri liečbe rakoviny.

Tkanivo
Obličky
Choroba
Wilmsov nádor
Miesto metastáz
Pleurálny výpotok
Synonymá
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach.
Karyotyp
(P12) hypotriploidné až hypertriploidné (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) s abnormalitami vrátane akrocentrických fragmentov, sekundárnych zúžení a veľkých subtelocentrických markerov

04Identifikátory

Citácia
SK-NEP-1 (katalógové číslo Cytion 300341)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Prejav a náchylnosť

Izoenzýmy
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, produkt frekvencie fenotypu: 0.0029
Mutčný profil
Mutácia P53

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukóza, w: stabilný glutamín, w: 2,0 mM pyruvát sodný, w: 2,2 g/l NaHCO3 (číslo článku Cytion 820200a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
25 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský