الانتقال إلى المحتوى
SK-NEP-1
الأنسجة
الكلى
المرض
ورم ويلمز
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

المستندات

SK-NEP-1

Cell line · رقم المنتج 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

SK-NEP-1 هو خط خلوي بشري مشتق في الأصل من ورم أرومي كلوي، يُعرف أيضاً باسم ورم ويلمز، وهو ورم خبيث شائع في الكلى لدى الأطفال. وقد استُخدم هذا الخط الخلوي على نطاق واسع في الأبحاث قبل السريرية لدراسة بيولوجيا الورم الأرومي الكلوي وتقييم الأساليب العلاجية الجديدة لعلاج ورم ويلمز. ومع ذلك، كشفت التوصيفات الجزيئية اللاحقة أن سلالة SK-NEP-1 تعبر عن جين الاندماج EWS-FLI1 الذي يميز ساركوما إيوينغ، مما يشير إلى أن هذا الخط الخلوي أكثر تمثيلاً لعائلة أورام إيوينغ بدلاً من ورم ويلمز. هذا الاكتشاف له آثار مهمة لتفسير الأبحاث السابقة التي استخدمت SK-NEP-1، حيث أن خصائصه البيولوجية تتماشى بشكل أكبر مع ساركوما إيوينج بدلاً من ورم ويلمز الكشمي.

وقد أظهرت الأبحاث التي أجريت على ورم SK-NEP-1 أنه يستجيب لعوامل العلاج الكيميائي مثل الفينكريستين، الذي يثبط بلمرة الأنابيب الدقيقة، مما يؤدي إلى توقف المرحلة G2/M وموت الخلايا المبرمج. بالإضافة إلى ذلك، أظهرت العلاجات المركبة باستخدام مركبات طبيعية مثل الأندروجرافوليد تأثيرات تآزرية في زيادة السمية الخلوية للفينكريستين على خلايا SK-NEP-1، وذلك من خلال مسار إشارات PI3K-AKT-p53 في المقام الأول. وقد ثبت أن هذا المزيج يحفز موت الخلايا المبرمج في خلايا SK-NEP-1، سواء في المختبر أو في الجسم الحي، مما يجعله نهجًا واعدًا لعلاج الأورام التي تشترك في الخصائص الجزيئية لـ SK-NEP-1.

وبالتالي، يُعدّ SK-NEP-1 نموذجاً بالغ الأهمية لدراسة الأسس الجزيئية لأورام ساركوما الكلى وساركوما إيوينج لدى الأطفال ولتقييم فعالية تركيبات الأدوية التي تهدف إلى تحسين النتائج العلاجية في هذه الأنواع السرطانية. وقد ساهم استخدامه في الأبحاث في فهم موت الخلايا المبرمج الناجم عن الأدوية وإمكانية استهداف مسارات إشارات محددة مثل PI3K-AKT-p53 في علاج السرطان.

الأنسجة
الكلى
المرض
ورم ويلمز
موقع الانتشار
الانصباب الجنبي
المرادفات
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
التعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران العارية.
النمط الكروموسومي
(P12) ناقصة الصبغيات إلى مفرطة الصبغيات (+A1، +A2، +C، +D، +E، +F، +G) مع تشوهات تشمل شظايا متقاربة المركز، وتضيقات ثانوية وعلامات تيلوسنترية كبيرة

04المعرّفات

المرجع
SK-NEP-1 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300341)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0631

05التعبير والقابلية للإصابة

الإيزوزيمات
PGM3، 1، PGM1، 1-2، ES-D، 1، Me-2، 2، AK-1، 1، GLO-1، 2، G6PD، B، منتج تردد النمط الظاهري: 0.0029
الأنماط الطفريّة
طفرة P53

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
مكويز 5 أ، ث: 3.0 جم/لتر جلوكوز، ث: جلوتامين مستقر، ث: 2.0 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820200 أ)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
إعادة الاستنبات
حافظ على الثقافات عن طريق إضافة أو استبدال الوسط بشكل دوري. ابدأ الثقافات بكثافة 5 × 105 خلية/مل وحافظ على تركيز الخلايا في نطاق 3 × 105 إلى 1 × 106 خلية/مل لتحقيق النمو الأمثل.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
25 سنة
الأصل العرقي
قوقازي