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SK-NEP-1
Pañuelo de papel
Riñón
Enfermedad
Tumor de Wilms
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Documentos

SK-NEP-1

Cell line · Número de producto 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

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01Información general

Descripción

SK-NEP-1 es una línea celular humana derivada originalmente de un nefroblastoma, también conocido como tumor de Wilms, una neoplasia renal pediátrica frecuente. Esta línea celular se ha utilizado ampliamente en la investigación preclínica para estudiar la biología del nefroblastoma y evaluar nuevos enfoques terapéuticos para el tratamiento del tumor de Wilms. Sin embargo, caracterizaciones moleculares posteriores revelaron que SK-NEP-1 expresa el gen de fusión EWS-FLI1, característico del sarcoma de Ewing, lo que indica que esta línea celular es más representativa de la familia de tumores de Ewing que del tumor de Wilms. Este descubrimiento tiene importantes implicaciones para la interpretación de investigaciones anteriores en las que se utilizó SK-NEP-1, ya que sus características biológicas se ajustan más al sarcoma de Ewing que al tumor de Wilms anaplásico.

Las investigaciones con SK-NEP-1 han demostrado que responde a agentes quimioterapéuticos como la vincristina, que inhibe la polimerización de los microtúbulos y provoca la detención de la fase G2/M y la apoptosis. Además, las terapias combinadas con compuestos naturales como la andrografolida han demostrado efectos sinérgicos en el aumento de la citotoxicidad de la vincristina en las células SK-NEP-1, principalmente a través de la vía de señalización PI3K-AKT-p53. Se demostró que esta combinación induce la apoptosis en las células SK-NEP-1, tanto in vitro como in vivo, lo que la convierte en un enfoque prometedor para el tratamiento de tumores que comparten las características moleculares de SK-NEP-1.

El SK-NEP-1 es, por tanto, un modelo fundamental para estudiar las bases moleculares de los tumores renales pediátricos y del sarcoma de Ewing, así como para evaluar la eficacia de las combinaciones de fármacos destinadas a mejorar los resultados terapéuticos en estos tipos de cáncer. Su uso en investigación ha contribuido a comprender la apoptosis inducida por fármacos y el potencial de dirigir vías de señalización específicas como PI3K-AKT-p53 en la terapia del cáncer.

Pañuelo de papel
Riñón
Enfermedad
Tumor de Wilms
Lugar de metástasis
Derrame pleural
Sinónimos
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sí, en ratones desnudos.
Cariotipo
(P12) hipotriploide a hipertriploide (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) con anomalías que incluyen fragmentos acrocéntricos, constricciones secundarias y grandes marcadores subtelocéntricos

04Identificadores

Referencia
SK-NEP-1 (número de catálogo 300341 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Expresión y susceptibilidad

Isoenzimas
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Producto de Frecuencia de Fenotipo: 0.0029
Perfil mutacional
P53 mut

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glucosa, w: Glutamina estable, w: 2,0 mM Piruvato sódico, w: 2,2 g/L NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820200a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Subcultivo
Mantenga los cultivos añadiendo o sustituyendo periódicamente el medio. Inicie los cultivos con una densidad de 5 x 105 células/ml y mantenga la concentración celular dentro del rango de 3 x 105 a 1 x 106 células/ml para un crecimiento óptimo.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
25 años
Origen étnico
Caucásico