01General information
- Description
SK-NEP-1 是一种人体细胞系，最初来源于肾母细胞瘤，又称威尔姆斯肿瘤，是一种常见的小儿肾脏恶性肿瘤。这种细胞系被广泛用于临床前研究，以研究肾母细胞瘤的生物学特性，并评估治疗威尔姆斯肿瘤的新疗法。然而，后来的分子特征研究发现，SK-NEP-1 表达的 EWS-FLI1 融合基因是尤文肉瘤的特征，这表明该细胞系更能代表尤文家族肿瘤，而不是威尔姆斯肿瘤。这一发现对于解释过去利用 SK-NEP-1 进行的研究具有重要意义，因为它的生物学特征更接近于尤文肉瘤，而不是无弹性威尔姆斯肿瘤。
涉及 SK-NEP-1 的研究表明，它对长春新碱等化疗药物有反应，长春新碱可抑制微管聚合，导致 G2/M 期停滞和细胞凋亡。此外，使用穿心莲内酯等天然化合物的联合疗法显示出协同效应，主要通过 PI3K-AKT-p53 信号通路增加长春新碱对 SK-NEP-1 细胞的细胞毒性。研究表明，这种联合疗法可在体外和体内诱导 SK-NEP-1 细胞凋亡，因此是治疗具有 SK-NEP-1 相同分子特征的肿瘤的一种很有前景的方法。
因此，SK-NEP-1 是研究小儿肾癌和尤文肉瘤的分子基础以及评估旨在改善这些癌症类型治疗效果的药物组合有效性的重要模型。将其用于研究有助于了解药物诱导的细胞凋亡以及在癌症治疗中靶向 PI3K-AKT-p53 等特定信号通路的潜力。
- Tissue
- 肾脏
- Disease
- Wilms 肿瘤
- Metastatic site
- 胸腔积液
- Synonyms
- SKNEP-1
- SKNEP1
- SKNEP
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 上皮样
- Tumourigenic
- 是的，在裸鼠身上。
- Karyotype
- (P12)低倍体到高倍体（+A1、+A2、+C、+D、+E、+F、+G），异常包括尖头片段、继发性收缩和大的亚端粒中心标记物
04Identifiers
- Citation
- SK-NEP-1（Cytion 目录号 300341）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0631
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- PGM3，1，PGM1，1-2，ES-D，1，Me-2，2，AK-1，1，GLO-1，2，G6PD，B，表型频率产物： 0.0029
- Mutational profile
- P53 突变
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a，w：3.0 克/升葡萄糖，w：稳定谷氨酰胺，w：2.0 毫摩尔丙酮酸钠，w：2.2 克/升 NaHCO3（Cytion 文章编号 820200a）。
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, 加湿环境。
- Supplements
- 在培养基中添加 10% FBS
- Subculturing
- 通过定期添加或更换培养基来维持细胞培养。初始培养时细胞密度应为5×10⁵个细胞/毫升，并保持细胞浓度在3×10⁵至1×10⁶个细胞/毫升范围内以获得最佳生长效果。
- Fluid renewal
- 每周 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。
为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。
- Freeze medium
- 我们使用完全生长培养基（包括 FBS）+10% DMSO 或 CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）作为冷冻保存培养基，以获得足够的解冻后存活率，CM-1（Cytion 商品目录编号 800100）含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
- Storage conditions
如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。
- Shipping conditions
冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。
08Donor
- Donor age
- 25 年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 计划将低温样品储存在液氮中以便将来解冻时，必须遵守严格的安全措施。在将冷冻样本移入或移出液氮罐时，必须穿戴适当的防护手套和防护服，并使用面罩或安全护目镜。这样做是为了降低在移出时因冷冻样品爆炸而造成伤害的风险，因为爆炸可能导致锋利的碎片飞溅。
- Warranty
在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。
有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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