Skip to content
SK-NEP-1
Tissue
Thận
Disease
U bướu Wilms
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Documents

SK-NEP-1

Cell line · Product number 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

SK-NEP-1 là một dòng tế bào người ban đầu được phân lập từ một khối u thận bào (nephroblastoma), còn được gọi là u Wilms, một loại ung thư thận phổ biến ở trẻ em. Dòng tế bào này đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu tiền lâm sàng để nghiên cứu sinh học của u thận bào và đánh giá các phương pháp điều trị mới cho u Wilms. Tuy nhiên, các phân tích phân tử sau này đã chỉ ra rằng SK-NEP-1 biểu hiện gen hợp nhất EWS-FLI1, đặc trưng cho u Ewing, cho thấy dòng tế bào này đại diện cho gia đình u Ewing hơn là u Wilms. Phát hiện này có ý nghĩa quan trọng trong việc giải thích các nghiên cứu trước đây sử dụng SK-NEP-1, vì đặc điểm sinh học của nó phù hợp hơn với u Ewing hơn là u Wilms dạng ác tính.

Nghiên cứu liên quan đến SK-NEP-1 cho thấy dòng tế bào này nhạy cảm với các thuốc hóa trị như vincristine, chất ức chế quá trình polymer hóa vi ống, dẫn đến sự ức chế ở giai đoạn G2/M và apoptosis. Ngoài ra, các liệu pháp kết hợp sử dụng các hợp chất tự nhiên như andrographolide đã cho thấy tác dụng hiệp đồng trong việc tăng cường độc tính của vincristine đối với tế bào SK-NEP-1, chủ yếu thông qua con đường tín hiệu PI3K-AKT-p53. Sự kết hợp này đã được chứng minh là gây ra quá trình apoptosis ở tế bào SK-NEP-1, cả trong ống nghiệm và trên động vật thí nghiệm, làm cho nó trở thành một phương pháp đầy hứa hẹn trong điều trị các khối u có đặc điểm phân tử tương tự SK-NEP-1.

SK-NEP-1 do đó là mô hình quan trọng để nghiên cứu cơ chế phân tử của các khối u thận và sarcoma Ewing ở trẻ em, cũng như đánh giá hiệu quả của các phác đồ kết hợp thuốc nhằm cải thiện kết quả điều trị trong các loại ung thư này. Việc sử dụng SK-NEP-1 trong nghiên cứu đã góp phần hiểu rõ hơn về apoptosis do thuốc gây ra và tiềm năng của việc nhắm mục tiêu vào các con đường tín hiệu cụ thể như PI3K-AKT-p53 trong điều trị ung thư.

Tissue
Thận
Disease
U bướu Wilms
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, trên chuột không lông.
Karyotype
(P12) từ hypotriploid đến hypertriploid (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) với các bất thường bao gồm các mảnh acrocentric, các điểm thu hẹp thứ cấp và các dấu hiệu sub telocentric lớn

04Identifiers

Citation
SK-NEP-1 (Số catalog Cytion 300341)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Tần suất kiểu hình: 0,0029
Mutational profile
Biến đổi gen P53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, chứa: 3,0 g/L glucose, chứa: glutamine ổn định, chứa: 2,0 mM natri pyruvate, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Subculturing
Bảo quản các dòng tế bào bằng cách định kỳ bổ sung hoặc thay thế môi trường nuôi cấy. Khởi tạo các dòng tế bào với mật độ 5 x 10⁵ tế bào/ml và duy trì nồng độ tế bào trong khoảng từ 3 x 10⁵ đến 1 x 10⁶ tế bào/ml để đạt được sự phát triển tối ưu.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
25 năm
Ethnicity
Người da trắng