Siirry sisältöön
SK-NEP-1
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Wilmsin kasvain
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Asiakirjat

SK-NEP-1

Cell line · Tuotenumero 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

SK-NEP-1 on ihmisen solulinja, joka on alun perin peräisin nefroblastoomasta, joka tunnetaan myös nimellä Wilmsin kasvain, joka on yleinen lasten munuaisten pahanlaatuinen sairaus. Tätä solulinjaa on käytetty laajalti prekliinisessä tutkimuksessa nefroblastooman biologian tutkimiseen ja uusien terapeuttisten lähestymistapojen arviointiin Wilmsin kasvaimen hoidossa. Myöhemmin tehdyt molekyylitutkimukset kuitenkin osoittivat, että SK-NEP-1 ilmentää EWS-FLI1-fuusiogeeniä, joka on ominaista Ewingin sarkoomalle, mikä viittaa siihen, että tämä solulinja edustaa pikemminkin Ewingin kasvainperhettä kuin Wilmsin kasvainta. Tällä löydöksellä on merkittäviä vaikutuksia SK-NEP-1:tä hyödyntäneiden aiempien tutkimusten tulkintaan, sillä sen biologiset ominaisuudet vastaavat pikemminkin Ewingin sarkoomaa kuin anaplastista Wilmsin kasvainta.

SK-NEP-1:tä koskevat tutkimukset ovat osoittaneet, että se reagoi kemoterapia-aineisiin, kuten vinkristiiniin, joka estää mikrotubulusten polymerisaatiota, mikä johtaa G2/M-vaiheen pysähtymiseen ja apoptoosiin. Lisäksi yhdistelmähoidot, joissa käytetään luonnollisia yhdisteitä, kuten andrografolidia, ovat osoittaneet synergistisiä vaikutuksia, jotka lisäävät vinkristiinin sytotoksisuutta SK-NEP-1-soluissa pääasiassa PI3K-AKT-p53-signalointireitin kautta. Tämän yhdistelmän osoitettiin indusoivan apoptoosia SK-NEP-1-soluissa sekä in vitro että in vivo, mikä tekee siitä lupaavan lähestymistavan sellaisten kasvainten hoitoon, joilla on SK-NEP-1:n molekyylipiirteet.

SK-NEP-1 on näin ollen kriittinen malli lasten munuais- ja Ewingin sarkoomakasvainten molekulaaristen taustatekijöiden tutkimiseen ja sellaisten lääkeyhdistelmien tehokkuuden arviointiin, joilla pyritään parantamaan hoitotuloksia näissä syöpätyypeissä. Sen käyttö tutkimuksessa on auttanut ymmärtämään lääkkeiden aiheuttamaa apoptoosia ja mahdollisuuksia kohdistaa syöpähoidossa erityisiä signalointireittejä, kuten PI3K-AKT-p53.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Wilmsin kasvain
Metastaasikohde
Pleuraeffuusio
Synonyymit
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Jousitus
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, alastomilla hiirillä.
Karyotyyppi
(P12) hypotriploidista hypertriploidiin (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) ja poikkeavuuksia, kuten akrosentriset fragmentit, sekundaariset supistumat ja suuret subtelosentriset merkit

04Tunnisteet

Lähdeviite
SK-NEP-1 (Cytionin luettelonumero 300341)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Ilmentyminen ja alttius

Isoentsyymit
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotyypin frekvenssituote: 0.0029
Mutaatioprofiili
P53 mut

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glukoosia, w: vakaa glutamiini, w: 2,0 mM natriumpyruvaattia, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820200a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Soluviljely
Ylläpidä viljelmiä lisäämällä tai vaihtamalla kasvualusta säännöllisesti. Aloita viljelyt tiheydellä 5 x 105 solua/ml ja pidä solupitoisuus välillä 3 x 105 – 1 x 106 solua/ml optimaalisen kasvun saavuttamiseksi.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
25 vuotta
Etnisyys
Kaukasialainen