Skip to content
SK-NEP-1
Tissue
כליה
Disease
גידול וילמס
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Documents

SK-NEP-1

Cell line · Product number 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

US$650.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

SK-NEP-1 הוא קו תאים אנושי שמקורו בנפרובלסטומה, הידועה גם כגידול וילמס, גידול ממאיר נפוץ בכליות בקרב ילדים. קו תאים זה שימש רבות במחקרים פרה-קליניים לחקר הביולוגיה של נפרובלסטומה ולהערכת גישות טיפוליות חדשות לטיפול בגידול וילמס. עם זאת, מאפיינים מולקולריים מאוחרים יותר גילו כי SK-NEP-1 מבטא את הגן הממוזג EWS-FLI1, האופייני לסרקומה של יואינג, מה שמצביע על כך שקו תאים זה מייצג יותר את משפחת הגידולים של יואינג מאשר את גידול וילמס. לתגלית זו יש השלכות חשובות על פרשנות מחקרים קודמים שהשתמשו ב-SK-NEP-1, שכן המאפיינים הביולוגיים שלו תואמים יותר לסרקומה של יואינג מאשר לגידול וילמס אנאפלסטי.

מחקרים שבוצעו על SK-NEP-1 הראו כי הוא מגיב לתרופות כימותרפיות כגון וינקריסטין, המעכבת את פולימריזציה של מיקרוטובולים, מה שמוביל לעצירת שלב G2/M ואפופטוזיס. בנוסף, טיפולים משולבים המשתמשים בתרכובות טבעיות כמו אנדרוגרפוליד הראו השפעות סינרגטיות בהגברת הציטוטוקסיות של וינקריסטין על תאי SK-NEP-1, בעיקר באמצעות מסלול האיתות PI3K-AKT-p53. שילוב זה הוכח כגורם לאפופטוזיס בתאי SK-NEP-1, הן במבחנה והן in vivo, מה שהופך אותו לגישה מבטיחה לטיפול בגידולים החולקים את המאפיינים המולקולריים של SK-NEP-1.

SK-NEP-1 הוא אפוא מודל קריטי לחקר הבסיס המולקולרי של גידולים בכליות ובסרקומה של יואינג בילדים, ולהערכת היעילות של שילובי תרופות שמטרתם לשפר את התוצאות הטיפוליות בסוגים אלה של סרטן. השימוש בו במחקר תרם להבנת אפופטוזיס הנגרם על ידי תרופות והפוטנציאל של מיקוד במסלולי איתות ספציפיים כמו PI3K-AKT-p53 בטיפול בסרטן.

Tissue
כליה
Disease
גידול וילמס
Metastatic site
הצטברות נוזלים בחלל הצדר
Synonyms
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים.
Karyotype
(P12) היפותריפלואידי עד היפרטריפלואידי (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) עם חריגות הכוללות שברי אקרוצנטריים, היצרויות משניות וסמנים תת-טלוצנטריים גדולים

04Identifiers

Citation
SK-NEP-1 (מספר קטלוגי Cytion 300341)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0029
Mutational profile
מוטציה P53

06Handling and culture

Culture medium
McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Subculturing
שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
25 שנים
Ethnicity
קווקזי