
- Tissue
- כליה
- Disease
- גידול וילמס
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Synonyms
- SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP
Documents
01General information
- Description
SK-NEP-1 הוא קו תאים אנושי שמקורו בנפרובלסטומה, הידועה גם כגידול וילמס, גידול ממאיר נפוץ בכליות בקרב ילדים. קו תאים זה שימש רבות במחקרים פרה-קליניים לחקר הביולוגיה של נפרובלסטומה ולהערכת גישות טיפוליות חדשות לטיפול בגידול וילמס. עם זאת, מאפיינים מולקולריים מאוחרים יותר גילו כי SK-NEP-1 מבטא את הגן הממוזג EWS-FLI1, האופייני לסרקומה של יואינג, מה שמצביע על כך שקו תאים זה מייצג יותר את משפחת הגידולים של יואינג מאשר את גידול וילמס. לתגלית זו יש השלכות חשובות על פרשנות מחקרים קודמים שהשתמשו ב-SK-NEP-1, שכן המאפיינים הביולוגיים שלו תואמים יותר לסרקומה של יואינג מאשר לגידול וילמס אנאפלסטי.
מחקרים שבוצעו על SK-NEP-1 הראו כי הוא מגיב לתרופות כימותרפיות כגון וינקריסטין, המעכבת את פולימריזציה של מיקרוטובולים, מה שמוביל לעצירת שלב G2/M ואפופטוזיס. בנוסף, טיפולים משולבים המשתמשים בתרכובות טבעיות כמו אנדרוגרפוליד הראו השפעות סינרגטיות בהגברת הציטוטוקסיות של וינקריסטין על תאי SK-NEP-1, בעיקר באמצעות מסלול האיתות PI3K-AKT-p53. שילוב זה הוכח כגורם לאפופטוזיס בתאי SK-NEP-1, הן במבחנה והן in vivo, מה שהופך אותו לגישה מבטיחה לטיפול בגידולים החולקים את המאפיינים המולקולריים של SK-NEP-1.
SK-NEP-1 הוא אפוא מודל קריטי לחקר הבסיס המולקולרי של גידולים בכליות ובסרקומה של יואינג בילדים, ולהערכת היעילות של שילובי תרופות שמטרתם לשפר את התוצאות הטיפוליות בסוגים אלה של סרטן. השימוש בו במחקר תרם להבנת אפופטוזיס הנגרם על ידי תרופות והפוטנציאל של מיקוד במסלולי איתות ספציפיים כמו PI3K-AKT-p53 בטיפול בסרטן.
- Tissue
- כליה
- Disease
- גידול וילמס
- Metastatic site
- הצטברות נוזלים בחלל הצדר
- Synonyms
- SKNEP-1
- SKNEP1
- SKNEP
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים.
- Karyotype
- (P12) היפותריפלואידי עד היפרטריפלואידי (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) עם חריגות הכוללות שברי אקרוצנטריים, היצרויות משניות וסמנים תת-טלוצנטריים גדולים
04Identifiers
- Citation
- SK-NEP-1 (מספר קטלוגי Cytion 300341)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0631
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, תוצר תדירות הפנוטיפ: 0.0029
- Mutational profile
- מוטציה P53
06Handling and culture
- Culture medium
- McCoys 5a, w: 3.0 g/L גלוקוז, w: יציב גלוטמין, w: 2.0 mM נתרן פירובט, w: 2.2 g/L NaHCO3 (מספר פריט Cytion 820200a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Subculturing
- שמרו על התרבויות על ידי הוספה או החלפה תקופתית של המצע. התחילו את התרבויות בצפיפות של 5 x 105 תאים/מ"ל ושמרו על ריכוז התאים בטווח של 3 x 105 עד 1 x 106 תאים/מ"ל לצורך צמיחה מיטבית.
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 25 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes






.jpg)
