Премини към съдържанието
SK-NEP-1
Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Тумор на Вилмс
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Документи

SK-NEP-1

Cell line · Номер на продукта 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

SK-NEP-1 е човешка клетъчна линия, първоначално получена от нефробластом, известен също като тумор на Уилмс - често срещано детско злокачествено заболяване на бъбреците. Тази клетъчна линия се използва широко в предклинични изследвания за изучаване на биологията на нефробластома и за оценка на нови терапевтични подходи за лечение на тумор на Уилмс. По-късно обаче молекулярните характеристики разкриха, че SK-NEP-1 експресира сливащия се ген EWS-FLI1, който е характерен за саркома на Юинг, което показва, че тази клетъчна линия е по-скоро представител на семейството на туморите на Юинг, отколкото на тумора на Уилмс. Това откритие има важни последици за тълкуването на предишни изследвания, в които е използван SK-NEP-1, тъй като неговите биологични характеристики са по-близки до саркома на Юинг, отколкото до анапластичния тумор на Вилмс.

Изследванията, включващи SK-NEP-1, показват, че той реагира на химиотерапевтични агенти като винкристин, който инхибира полимеризацията на микротубулите, което води до спиране на G2/M фазата и апоптоза. Освен това комбинираните терапии, използващи естествени съединения като андрографолид, демонстрират синергичен ефект при увеличаване на цитотоксичността на винкристина върху клетките SK-NEP-1, главно чрез сигналния път PI3K-AKT-p53. Доказано е, че тази комбинация индуцира апоптоза в SK-NEP-1 клетките както in vitro, така и in vivo, което я прави обещаващ подход за лечение на тумори, които споделят молекулярните характеристики на SK-NEP-1.

По този начин SK-NEP-1 е важен модел за изучаване на молекулярните основи на педиатричните тумори на бъбреците и саркома на Юинг и за оценка на ефективността на лекарствени комбинации, насочени към подобряване на терапевтичните резултати при тези видове рак. Използването му в научните изследвания е допринесло за разбирането на апоптозата, предизвикана от лекарствата, и на потенциала за насочване на специфични сигнални пътища като PI3K-AKT-p53 в терапията на рака.

Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Тумор на Вилмс
Място на метастазите
Плеврален излив
Синоними
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Окачване
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки.
Кариотип
(P12) хипотриплоидни до хипертриплоидни (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) с аномалии, включително акроцентрични фрагменти, вторични стеснения и големи субтелоцентрични маркери

04Идентификатори

Източник
SK-NEP-1 (каталожен номер 300341 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0631

05Проява и предразположеност

Изоензими
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, продукт за честота на фенотипа: 0.0029
Мутационен профил
Мутация на P53

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
McCoys 5a, w: 3,0 g/L глюкоза, w: стабилен глутамин, w: 2,0 mM натриев пируват, w: 2,2 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820200a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Пресаждане
Поддържайте културите, като периодично добавяте или подменяте средата. Започнете културите с плътност 5 x 105 клетки/ml и поддържайте концентрацията на клетките в диапазона от 3 x 105 до 1 x 106 клетки/ml за оптимален растеж.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
25 години
Етническа принадлежност
Кавказки