Pāriet uz saturu
SK-NEP-1
Audums
Nieres
Slimība
Vilmsa audzējs
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Dokumenti

SK-NEP-1

Cell line · Preces numurs 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

SK-NEP-1 ir cilvēka šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no nefroblastomas, kas pazīstama arī kā Vilmsa audzējs - izplatīts nieru ļaundabīgs audzējs pediatrijā. Šī šūnu līnija ir plaši izmantota pirmsklīniskajos pētījumos, lai pētītu nefroblastomas bioloģiju un novērtētu jaunas terapeitiskās pieejas Vilmsa audzēja ārstēšanai. Tomēr vēlākā molekulārā raksturojumā atklājās, ka SK-NEP-1 ekspresē EWS-FLI1 saplūšanas gēnu, kas ir raksturīgs Evinga sarkomai, norādot, ka šī šūnu līnija vairāk pārstāv Evinga audzēju grupu, nevis Vilmsa audzēju. Šim atklājumam ir svarīga nozīme, interpretējot iepriekšējos pētījumus, kuros tika izmantota SK-NEP-1, jo tās bioloģiskās īpašības vairāk atbilst Evinga sarkomai, nevis anaplastiskajam Vilmsa audzējam.

Pētījumi ar SK-NEP-1 parādīja, ka tas ir jutīgs pret ķīmijterapijas līdzekļiem, piemēram, vinkristīnu, kas kavē mikrotubulu polimerizāciju, izraisot G2/M fāzes apstāšanos un apoptozi. Turklāt kombinētā terapija, izmantojot dabiskus savienojumus, piemēram, andrografolīdu, ir pierādījusi sinerģisku iedarbību, palielinot vinkristīna citotoksicitāti SK-NEP-1 šūnām, galvenokārt izmantojot PI3K-AKT-p53 signalizācijas ceļu. Tika pierādīts, ka šī kombinācija izraisa apoptozi SK-NEP-1 šūnās gan in vitro, gan in vivo, padarot to par daudzsološu pieeju SK-NEP-1 raksturīgo audzēju ārstēšanai.

Tādējādi SK-NEP-1 ir izšķirošs modelis, lai pētītu bērnu nieru un Jvinga sarkomas audzēju molekulāro pamatu un novērtētu zāļu kombināciju efektivitāti, kuru mērķis ir uzlabot terapeitiskos rezultātus šo vēža veidu gadījumā. Tā izmantošana pētniecībā ir palīdzējusi izprast zāļu izraisītu apoptozi un iespējas vēža terapijā mērķtiecīgi iedarboties uz specifiskiem signālu ceļiem, piemēram, PI3K-AKT-p53.

Audums
Nieres
Slimība
Vilmsa audzējs
Metastāžu vieta
Pleiras izsvīdums
Sinonīmi
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, kailām pelēm.
Kariotips
(P12) hipotriploīds līdz hipertriploīds (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) ar anomālijām, tostarp akrocentriskiem fragmentiem, sekundāriem sašaurinājumiem un lieliem subtelocentriskiem marķieriem

04Identifikatori

Atsauce
SK-NEP-1 (Cytion kataloga numurs 300341)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0029
Mutāciju profils
P53 mutācija

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
McCoys 5a, w: 3,0 g/l glikoze, w: stabils glutamīns, w: 2,0 mM nātrija piruvāts, w: 2,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820200a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
25 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis