SK-NEP-1

A SK-NEP-1 é uma linha celular humana originalmente derivada de um nefroblastoma, também conhecido como tumor de Wilms, uma neoplasia renal pediátrica comum. Esta linha celular tem sido amplamente utilizada na investigação pré-clínica para estudar a biologia do nefroblastoma e para avaliar novas abordagens terapêuticas para o tratamento do tumor de Wilms. No entanto, caracterizações moleculares posteriores revelaram que a SK-NEP-1 expressa o gene de fusão EWS-FLI1, que é caraterístico do sarcoma de Ewing, indicando que esta linha celular é mais representativa da família de tumores de Ewing do que do tumor de Wilms. Esta descoberta tem implicações importantes para a interpretação de investigações anteriores que utilizaram a SK-NEP-1, uma vez que as suas caraterísticas biológicas estão mais próximas do sarcoma de Ewing do que do tumor anaplásico de Wilms.

A investigação que envolveu o SK-NEP-1 mostrou que este responde a agentes quimioterapêuticos como a vincristina, que inibe a polimerização dos microtúbulos, levando à paragem da fase G2/M e à apoptose. Além disso, as terapias combinadas que utilizam compostos naturais como a andrographolide demonstraram efeitos sinérgicos no aumento da citotoxicidade da vincristina nas células SK-NEP-1, principalmente através da via de sinalização PI3K-AKT-p53. Esta combinação demonstrou induzir apoptose nas células SK-NEP-1, tanto in vitro como in vivo, tornando-a uma abordagem promissora para o tratamento de tumores que partilham as caraterísticas moleculares da SK-NEP-1.

O SK-NEP-1 é, assim, um modelo fundamental para o estudo das bases moleculares dos tumores pediátricos renais e do sarcoma de Ewing e para a avaliação da eficácia de combinações de medicamentos destinadas a melhorar os resultados terapêuticos nestes tipos de cancro. A sua utilização na investigação contribuiu para a compreensão da apoptose induzida por fármacos e do potencial de atingir vias de sinalização específicas como a PI3K-AKT-p53 na terapia do cancro.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia