Preskoči na vsebino
SK-NEP-1
Tkivo
Ledvice
Bolezen
Wilmsov tumor
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
SKNEP-1, SKNEP1, SKNEP

Dokumenti

SK-NEP-1

Cell line · Številka izdelka 300341

SK-NEP-1 is a human cell line originally derived from a nephroblastoma, also known as Wilms' tumor, a common pediatric renal malignancy. This cell line ha...

€650.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

SK-NEP-1 je človeška celična linija, ki izvira iz nefroblastoma, znanega tudi kot Wilmsov tumor, pogoste maligne bolezni ledvic pri otrocih. Ta celična linija se je pogosto uporabljala v predkliničnih raziskavah za preučevanje biologije nefroblastoma in ocenjevanje novih terapevtskih pristopov za zdravljenje Wilmsovega tumorja. Vendar so poznejše molekularne karakterizacije pokazale, da SK-NEP-1 izraža fuzijski gen EWS-FLI1, ki je značilen za Ewingov sarkom, kar kaže na to, da je ta celična linija bolj značilna za družino Ewingovih tumorjev kot za Wilmsov tumor. To odkritje ima pomembne posledice za razlago preteklih raziskav, ki so uporabljale SK-NEP-1, saj njene biološke značilnosti bolj ustrezajo sarkomu Ewing kot anaplastičnemu tumorju Wilms.

Raziskave s SK-NEP-1 so pokazale, da se odziva na kemoterapevtska sredstva, kot je vinkristin, ki zavira polimerizacijo mikrotubulov, kar povzroči zastoj faze G2/M in apoptozo. Poleg tega so kombinirane terapije z uporabo naravnih spojin, kot je andrografolid, pokazale sinergijske učinke pri povečanju citotoksičnosti vinkristina na celice SK-NEP-1, predvsem prek signalne poti PI3K-AKT-p53. Ta kombinacija je povzročila apoptozo v celicah SK-NEP-1 tako in vitro kot in vivo, zato je obetaven pristop za zdravljenje tumorjev, ki imajo enake molekularne značilnosti kot SK-NEP-1.

SK-NEP-1 je tako pomemben model za preučevanje molekularnih osnov pediatričnih tumorjev ledvic in Ewingovega sarkoma ter za ocenjevanje učinkovitosti kombinacij zdravil za izboljšanje terapevtskih rezultatov pri teh vrstah raka. Njegova uporaba v raziskavah je prispevala k razumevanju apoptoze, ki jo povzročajo zdravila, in možnosti usmerjanja specifičnih signalnih poti, kot je PI3K-AKT-p53, pri zdravljenju raka.

Tkivo
Ledvice
Bolezen
Wilmsov tumor
Mesto metastaze
Plevralni izliv
Sinonimi
  • SKNEP-1
  • SKNEP1
  • SKNEP

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Vzmetenje
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših.
Kariotip
(P12) hipotriploidni do hipertriploidni (+A1, +A2, +C, +D, +E, +F, +G) z nepravilnostmi, vključno z akrocentričnimi fragmenti, sekundarnimi zožitvami in velikimi subtelocentričnimi označevalci

04Identifikatorji

Navajanje vira
SK-NEP-1 (kataloška številka Cytion 300341)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0631

05Izražanje in dovzetnost

Izoenzimi
PGM3, 1, PGM1, 1-2, ES-D, 1, Me-2, 2, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotip Pogostost izdelka: 0.0029
Profil mutacij
Mutacija P53

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
McCoys 5a, w: 3,0 g/L glukoze, w: stabilen glutamin, w: 2,0 mM natrijevega piruvata, w: 2,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820200a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Preusmeritev v drugo kulturo
Kulture vzdržujte z rednim dodajanjem ali zamenjavo gojišča. Kulture začnite z gostoto 5 x 105 celic/ml in za optimalno rast ohranjajte koncentracijo celic v območju od 3 x 105 do 1 x 106 celic/ml.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
25 let
Etnična pripadnost
Kavkaški