SK-NEP-1

SK-NEP-1 er en human cellelinje, der oprindeligt stammer fra et nefroblastom, også kendt som Wilms' tumor, en almindelig pædiatrisk malignitet i nyrerne. Denne cellelinje er blevet brugt i stor udstrækning i præklinisk forskning til at studere nefroblastomets biologi og til at evaluere nye terapeutiske tilgange til behandling af Wilms' tumor. Senere molekylære karakteriseringer afslørede dog, at SK-NEP-1 udtrykker EWS-FLI1-fusionsgenet, som er karakteristisk for Ewing-sarkom, hvilket indikerer, at denne cellelinje er mere repræsentativ for Ewing-familien af tumorer end for Wilms' tumor. Denne opdagelse har vigtige konsekvenser for fortolkningen af tidligere forskning, der har brugt SK-NEP-1, da dens biologiske egenskaber stemmer bedre overens med Ewing-sarkom end med anaplastisk Wilms' tumor.

Forskning med SK-NEP-1 har vist, at den reagerer på kemoterapimidler som vincristin, der hæmmer mikrotubuli-polymerisering, hvilket fører til G2/M-fasestop og apoptose. Derudover har kombinationsterapier med naturlige forbindelser som andrografolid vist synergistiske effekter ved at øge vincristins cytotoksicitet på SK-NEP-1-celler, primært gennem PI3K-AKT-p53-signalvejen. Denne kombination viste sig at fremkalde apoptose i SK-NEP-1-celler, både in vitro og in vivo, hvilket gør det til en lovende tilgang til behandling af tumorer, der deler de molekylære egenskaber ved SK-NEP-1.

SK-NEP-1 er således en vigtig model til undersøgelse af de molekylære forudsætninger for pædiatriske nyre- og Ewing-sarkomtumorer og til evaluering af effektiviteten af lægemiddelkombinationer, der har til formål at forbedre de terapeutiske resultater i disse kræfttyper. Brugen af den i forskning har bidraget til at forstå lægemiddelinduceret apoptose og potentialet i at målrette specifikke signalveje som PI3K-AKT-p53 i kræftbehandling.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring