B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 הוא קו תאים לימפוציטואידיים אנושיים שהונצחו על ידי נגיף אפשטיין-בר (EBV) שהוקם מתאי B החודרים לגידול (TiBc) שהופקו מקרצינומה קולורקטלית ראשונית המכונה HROC68. הגידול המקורי היה קרצינומה קולורקטלית מסוג ספורדי שהוסרה ממטופל בוגר עם מחלה בשלב מתקדם. רקמת הגידול הטרייה הופרדה מכנית, ותאי B הודגרו בנוכחות supernatant המכיל EBV שמקורו בקו תאים B95/8 marmoset, יחד עם cyclosporin A כדי לדכא את צמיחת תאי T ו-NK. תרבית ארוכת טווח הביאה להתפשטות מונוקלונלית של תאי B, כפי שאושר על ידי ניתוח של שינוי גנים של אימונוגלובולינים באמצעות פרוטוקולי PCR מרובי BIOMED-2, שהדגים דפוס שינוי דומיננטי יחיד התואם למקור קלונלי.

B-LCL-HROC68 מפריש אימונוגלובולין G (IgG) כאיזוטופ הבלעדי שלו, עם ייצור יציב לאורך תרבות ממושכת. בבדיקת ELISA מבוססת תאים נגד קווי תאים של סרטן המעי הגס האלוגני (HROC24, HROC46 ו-HCT116), IgG שמקורו ב-B-LCL-HROC68 הדגים קישור מדיד לתאי הגידול, עם האות החזק ביותר שנצפה נגד תאי HCT116. עם זאת, אימות ציטומטרי זרימה שבוצע לאחר מכן הצביע על זיקה חלשה יחסית לקישור בהשוואה ל-IgG אחרים שמקורם ב-TiBc. ממצאים אלה מצביעים על כך ש-B-LCL-HROC68 מייצג קו תאים B חד-שבטיים, בעלי ניסיון אנטיגני, המסוגלים לייצר IgG פונקציונלי עם תגובתיות תאי גידול ניתנת לזיהוי, המספקים כלי שימושי במבחנה לחקר תגובות חיסוניות הומורליות בסביבה המיקרו-סביבתית של קרצינומה של המעי הגס ולזיהוי פוטנציאלי של אנטיגנים הקשורים לגידול.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו