B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 è una linea cellulare linfoblastoide B umana immortalizzata dal virus di Epstein-Barr (EBV) ottenuta da cellule B infiltranti il tumore (TiBc) isolate da un carcinoma colorettale primario denominato HROC68. Il tumore parentale era un carcinoma colorettale di tipo sporadico asportato da un paziente maschio adulto con malattia in stadio avanzato. Il tessuto tumorale fresco è stato dissociato meccanicamente e le cellule B sono state coltivate in presenza di supernatante contenente EBV derivato dalla linea cellulare B95/8 marmoset, insieme a ciclosporina A per sopprimere la crescita delle cellule T e NK. La coltura a lungo termine ha portato all'espansione monoclonale delle cellule B, come confermato dall'analisi del riarrangiamento del gene dell'immunoglobulina utilizzando protocolli PCR multiplex BIOMED-2, dimostrando un unico modello di riarrangiamento dominante coerente con l'origine clonale.

B-LCL-HROC68 secerne immunoglobulina G (IgG) come isotipo esclusivo, con produzione stabile durante la coltura prolungata. Nello screening ELISA basato sulle cellule contro linee cellulari allogeniche di cancro colorettale (HROC24, HROC46 e HCT116), l'IgG derivata da B-LCL-HROC68 ha dimostrato un legame misurabile con le cellule tumorali, con il segnale più forte osservato contro le cellule HCT116. Tuttavia, la successiva validazione citometrica a flusso ha indicato un'affinità di legame relativamente debole rispetto ad altre IgG derivate da TiBc. Questi risultati indicano che B-LCL-HROC68 rappresenta una linea cellulare B monoclonal

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia