B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68은 원발성 대장암종(HROC68)에서 분리된 종양 침윤 B 세포(TiBc)로부터 확립된 에프스타인-바 바이러스(EBV) 불멸화 인간 B 림프모구세포주이다. 모종양은 진행성 질환을 가진 성인 남성 환자로부터 절제된 산발성 대장암종이었다. 신선한 종양 조직을 기계적으로 분리한 후, B 세포를 B95/8 마모셋 세포주에서 유래한 EBV 함유 상층액과 함께 배양하였으며, T 세포 및 NK 세포의 증식을 억제하기 위해 사이클로스포린 A를 첨가하였습니다. 장기간 배양 결과, BIOMED-2 다중 PCR 프로토콜을 이용한 면역글로불린 유전자 재조합 분석을 통해 확인된 바와 같이, 클론 기원과 일치하는 단일 우성 재조합 패턴을 보이는 B 세포의 단일 클론적 증식이 이루어졌다.

B-LCL-HROC68은 면역글로불린 G(IgG)를 유일한 이소타입으로 분비하며, 장기간 배양에도 안정적으로 생산된다. 동종 대장암 세포주(HROC24, HROC46 및 HCT116)를 대상으로 한 세포 기반 ELISA 스크리닝에서 B-LCL-HROC68 유래 IgG는 측정 가능한 종양 세포 결합을 보였으며, HCT116 세포에 대해 가장 강한 신호가 관찰되었습니다. 그러나 후속 유세포 분석 검증 결과, 다른 TiBc 유래 IgG에 비해 상대적으로 약한 결합 친화도를 나타냈습니다. 이러한 결과는 B-LCL-HROC68이 항원 경험이 있는 종양 침윤 B세포 계통으로, 검출 가능한 종양 세포 반응성을 지닌 기능적 IgG를 생산할 수 있음을 시사하며, 대장암 미세환경 내 체액성 면역 반응 연구 및 종양 연관 항원 잠재적 식별을 위한 유용한 체외 연구 도구를 제공한다.

37°C, 5%_CO2, 습한 대기.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

싸이티온은 제품의 품질과 생존력을 보증합니다. 당사는 당사 시설에서 배송된 후 60일 동안 배양 시작 시 세포가 생존할 수 있음을 보증합니다. 당사는 모든 재료가 분석 증명서 및/또는 제품 시트에 설명된 사양을 준수함을 보증합니다

자세한 내용은 <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">보증서 를 참조하시기 바랍니다