B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 on Epstein-Barr viirusega (EBV) immortaliseeritud inimese B-lümfoblastoidne rakuliin, mis on loodud primaarse kolorektaalse kartsinoomi HROC68-st isoleeritud kasvajasse infiltreerunud B-rakkudest (TiBc). Vanemkasvaja oli sporadiline kolorektaalne kartsinoom, mis oli eemaldatud täiskasvanud meespatsiendilt, kellel oli haigus edasijõudnud staadiumis. Värske kasvajakoest eraldati mehaaniliselt B-rakud, mida kultiveeriti EBV-d sisaldava supernatandi juuresolekul, mis oli saadud B95/8 marmoseti rakuliinist, koos tsüklosporiini A-ga, et pärssida T- ja NK-rakkude kasvu. Pikaajaline kultiveerimine viis B-rakkude monoklonaalseks paljunemiseks, mis kinnitati BIOMED-2 multiplex PCR protokollide abil tehtud immunoglobuliini geeni ümberkorralduse analüüsiga, mis näitas üht domineerivat ümberkorralduse mustrit, mis vastas kloonilisele päritolule.

B-LCL-HROC68 eritab immunoglobuliini G (IgG) kui oma ainsa isotüübi, mille tootmine on pikaajalise kultiveerimise jooksul stabiilne. Rakkudel põhinevas ELISA-skriiningus allogeensete kolorektaalse vähi rakuliinide (HROC24, HROC46 ja HCT116) vastu näitas B-LCL-HROC68-st saadud IgG mõõdetavat tuumorrakkude sidumist, kusjuures tugevaim signaal täheldati HCT116 rakkude vastu. Siiski näitas järgnev voolutsütomeetriline valideerimine võrreldes teiste TiBc-st saadud IgG-dega suhteliselt nõrka sidumisafiinsust. Need tulemused näitavad, et B-LCL-HROC68 esindab monoklonaalset, antigeeniga kokku puutunud kasvajasse imbunud B-rakuliini, mis on võimeline tootma funktsionaalset IgG-d, millel on tuvastatav kasvajarakkude reaktiivsus, pakkudes kasulikku in vitro vahendit kolorektaalse kartsinoomi mikrokeskkonnas humoraalse immuunvastuse uurimiseks ja kasvajaga seotud antigeenide potentsiaalseks identifitseerimiseks.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest