B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 เป็นเซลล์ไลน์ลิมโฟบลาสต์ของมนุษย์ที่คงสภาพอมตะด้วยไวรัสเอปสไตน์-บาร์ (EBV) ซึ่งสร้างขึ้นจากเซลล์บีลิมโฟบลาสต์ที่แทรกซึมในเนื้องอก (TiBc) ที่แยกได้จากมะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิดปฐมภูมิที่ระบุชื่อว่า HROC68 เซลล์ต้นกำเนิดของเซลล์ไลน์นี้มาจากเนื้องอกมะเร็งลำไส้ใหญ่ชนิดกระจัดกระจายที่ผ่าตัดออกจากผู้ป่วยชายวัยผู้ใหญ่ที่มีโรคในระยะลุกลาม เนื้อเยื่อเนื้องอกสดถูกแยกออกจากกันทางกลไก และเซลล์บีถูกเพาะเลี้ยงในสภาวะที่มีสารเหนือเซลล์ที่มีเชื้อ EBV ซึ่งได้มาจากสายเซลล์ B95/8 ของลิงมาร์โมเซต พร้อมกับไซโคลสปอรินเอเพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตของเซลล์ทีและเซลล์เอ็นเค การเพาะเลี้ยงในระยะยาวส่งผลให้เกิดการขยายตัวของเซลล์บีแบบโมโนโคลนอล ซึ่งได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์การจัดเรียงยีนอิมมูโนโกลบูลินโดยใช้โปรโตคอล BIOMED-2 multiplex PCR ซึ่งแสดงให้เห็นรูปแบบการจัดเรียงที่โดดเด่นเพียงรูปแบบเดียวซึ่งสอดคล้องกับต้นกำเนิดแบบโคลน

B-LCL-HROC68 ผลิตอิมมูโนโกลบูลิน G (IgG) เป็นไอโซไทป์เฉพาะ โดยมีอัตราการผลิตที่คงที่ตลอดการเพาะเลี้ยงเป็นระยะเวลานาน ในการคัดกรอง ELISA ที่ใช้เซลล์เป็นพื้นฐานต่อเซลล์ไลน์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักชนิด allogeneic (HROC24, HROC46 และ HCT116) พบว่า IgG ที่ได้จาก B-LCL-HROC68 แสดงการจับกับเซลล์มะเร็งที่สามารถวัดได้ โดยมีสัญญาณที่แรงที่สุดเมื่อเทียบกับเซลล์ HCT116 อย่างไรก็ตาม การตรวจสอบยืนยันด้วย flow cytometry ในภายหลังพบว่ามีความสามารถในการจับกับเซลล์มะเร็งที่อ่อนกว่าเมื่อเทียบกับ IgG ที่ได้จาก TiBc อื่นๆ ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า B-LCL-HROC68 เป็นเซลล์ไลน์ B ที่แทรกซึมในเนื้องอกชนิดโมโนโคลนอลซึ่งมีประสบการณ์กับแอนติเจน และสามารถผลิต IgG ที่ทำงานได้พร้อมความสามารถในการตอบสนองต่อเซลล์เนื้องอกที่ตรวจพบได้ จึงเป็นเครื่องมือในหลอดทดลองที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันแบบของเหลวภายในสภาพแวดล้อมจุลภาคของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก และสำหรับการระบุแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอกที่อาจเกิดขึ้นได้

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.