B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 je človeška B-limfoblastna celična linija, nesmrtena z virusom Epstein-Barr (EBV), vzpostavljena iz tumorja infiltrirajočih B-celic (TiBc), izoliranih iz primarnega kolorektalnega karcinoma, imenovanega HROC68. Starševski tumor je bil sporadični kolorektalni karcinom, odstranjen iz odraslega moškega pacienta z napredno boleznijo. Sveže tumorsko tkivo je bilo mehansko razgrajeno, B-celice pa so bile gojene v prisotnosti supernatanta, ki vsebuje EBV, pridobljenega iz celične linije marmosetov B95/8, skupaj s ciklosporinom A za zaviranje rasti T- in NK-celic. Dolgotrajna kultura je povzročila monoklonalno razširitev B-celic, kar je potrdila analiza preureditve imunoglobulinskega gena z uporabo BIOMED-2 multipleksnih PCR protokolov, ki je pokazala enoten prevladujoč vzorec preureditve, skladen s klonalnim izvorom.

B-LCL-HROC68 izloča imunoglobulin G (IgG) kot svoj ekskluzivni izotip, s stabilno proizvodnjo med podaljšano kultiviranjem. V celičnem ELISA presejanju proti alogenim celičnim linijam kolorektalnega raka (HROC24, HROC46 in HCT116) je IgG, pridobljen iz B-LCL-HROC68, pokazal merljivo vezavo na tumorske celice, pri čemer je bil najmočnejši signal opazen proti celicam HCT116. Vendar je naknadna validacija s pretočno citometrijo pokazala sorazmerno šibko vezavno afiniteto v primerjavi z drugimi IgG, pridobljenimi iz TiBc. Ti rezultati kažejo, da B-LCL-HROC68 predstavlja monoklonalno, antigenu izpostavljeno linijo B-celic, ki infiltrira tumor in je sposobna proizvajati funkcionalni IgG z zaznavno reaktivnostjo tumorjev, kar zagotavlja uporabno in vitro orodje za preučevanje humoralnih imunskih odzivov v mikrookolju kolorektalnega karcinoma in za potencialno identifikacijo tumorjev povezanih antigenov.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo