B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68系一种由原发性结直肠癌（命名为HROC68）中分离的肿瘤浸润性B细胞（TiBc）建立的、经爱泼斯坦-巴尔病毒（EBV）永生化的人B淋巴母细胞样细胞系。该亲本肿瘤为散发性结直肠癌，取自一名晚期男性患者的切除标本。 新鲜肿瘤组织经机械分离后，在含EBV的B95/8松鼠猴细胞系上清液中培养B细胞，同时添加环孢素A抑制T细胞和NK细胞增殖。 长期培养后，B细胞呈现单克隆扩增，通过BIOMED-2多重PCR方案进行的免疫球蛋白基因重排分析证实，其表现出单一优势重排模式，符合克隆起源特征。

B-LCL-HROC68 细胞系分泌的免疫球蛋白 G (IgG) 是其唯一的同种型，在长期培养过程中保持稳定生产。 在针对异源性结直肠癌细胞系（HROC24、HROC46和HCT116）的细胞基ELISA筛选中，B-LCL-HROC68衍生的IgG显示出可测量的肿瘤细胞结合能力，其中对HCT116细胞的结合信号最强。然而后续流式细胞术验证表明，其结合亲和力相较于其他肿瘤浸润B细胞衍生的IgG较弱。 这些发现表明，B-LCL-HROC68代表一种单克隆、具有抗原经验的肿瘤浸润性B细胞系，能够产生具有可检测肿瘤细胞反应性的功能性IgG，为研究结直肠癌微环境中的体液免疫反应以及潜在肿瘤相关抗原的鉴定提供了有用的体外工具。

37°C, 5%_CO2, 加湿环境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

在Cytion，我们保证产品的质量和活力。 我们保证，从我们的工厂发货后 60 天内，我们的细胞在开始培养时都是存活的。 我们保证所有材料均符合分析证书和/或产品说明书中描述的规格。

有关详细信息，请参阅我们的 <a href="" /Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">保修声明 。