B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 ir Epšteina-Barra vīrusa (EBV) imortalizēta cilvēka B limfoblastoīdu šūnu līnija, kas izveidota no audzēja infiltrējošām B šūnām (TiBc), kas izdalītas no primārā kolorektālā karcinoma, kas apzīmēts kā HROC68. Vecāku audzējs bija sporādiska tipa kolorektālais karcinoms, kas izgriezts no pieaugušam vīriešu pacientam ar slimības progresējošu stadiju. Svaigs audzēja audi tika mehāniski disociēti, un B šūnas tika kultivētas EBV saturoša supernatanta klātbūtnē, kas iegūts no B95/8 marmoset šūnu līnijas, kopā ar ciklosporīnu A, lai nomāktu T un NK šūnu izaugšanu. Ilgtermiņa kultivēšana izraisīja B šūnu monoklonālu izplatīšanos, ko apstiprināja imūnglobulīna gēna pārkārtojuma analīze, izmantojot BIOMED-2 multipleksa PCR protokolus, kas parādīja vienu dominējošu pārkārtojuma modeli, kas atbilst klonālajai izcelsmei.

B-LCL-HROC68 izdalīja imūnglobulīnu G (IgG) kā savu ekskluzīvo izotipu, ar stabilu ražošanu ilgstošas kultivēšanas laikā. Šūnu bāzētā ELISA skrīningā pret alogēnām kolorektālā vēža šūnu līnijām (HROC24, HROC46 un HCT116) no B-LCL-HROC68 iegūtais IgG demonstrēja izmērāmu saistīšanos ar audzēja šūnām, visstiprākais signāls tika novērots pret HCT116 šūnām. Tomēr turpmāka plūsmas citometrijas validācija norādīja salīdzinoši vāju saistīšanās afinitāti salīdzinājumā ar citiem no TiBc iegūtiem IgG. Šie rezultāti liecina, ka B-LCL-HROC68 ir monoklonāla, antigēnu pieredzējusi audzēju infiltrējoša B šūnu līnija, kas spēj ražot funkcionālu IgG ar nosakāmu audzēju šūnu reaktivitāti, nodrošinot noderīgu in vitro instrumentu humoro imūnreakciju izpētei kolorektālā karcinoma mikroapvidū un potenciālai audzēju saistītu antigēnu identifikācijai.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu