B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 je ľudská B lymfoblastoidná bunka imortalizovaná vírusom Epstein-Barr (EBV), vytvorená z nádorových infiltrujúcich B buniek (TiBc) izolovaných z primárneho kolorektálneho karcinómu označeného ako HROC68. Pôvodným nádorom bol sporadický kolorektálny karcinóm odstránený z dospelého mužského pacienta s pokročilým štádiom ochorenia. Čerstvá nádorová tkanina bola mechanicky disociovaná a B bunky boli kultivované v prítomnosti supernatantu obsahujúceho EBV odvodeného z bunky B95/8 marmoset, spolu s cyklosporínom A na potlačenie rastu T a NK buniek. Dlhodobá kultivácia viedla k monoklonálnej expanzii B buniek, čo potvrdila analýza reorganizácie génov imunoglobulínu pomocou multiplexných PCR protokolov BIOMED-2, ktorá preukázala jediný dominantný reorganizčný vzor konzistentný s klonálnym pôvodom.

B-LCL-HROC68 vylučuje imunoglobulín G (IgG) ako svoj výhradný izotyp, s stabilnou produkciou počas dlhodobej kultivácie. Pri skríningu ELISA na báze buniek proti alogénnym bunkovým líniám kolorektálneho karcinómu (HROC24, HROC46 a HCT116) IgG odvodený z B-LCL-HROC68 preukázal merateľnú väzbu na nádorové bunky, pričom najsilnejší signál bol pozorovaný proti bunkám HCT116. Následná validácia prietokovou cytometriou však ukázala porovnateľne slabú väzbovú afinitu v porovnaní s inými IgG odvodenými z TiBc. Tieto zistenia naznačujú, že B-LCL-HROC68 predstavuje monoklonálnu, antigénom skúsenú líniu B-buniek infiltrujúcich nádor, schopnú produkovať funkčné IgG s detekovateľnou reaktivitou nádorových buniek, čo poskytuje užitočný in vitro nástroj na skúmanie humorálnych imunitných reakcií v mikroprostredí kolorektálneho karcinómu a na potenciálnu identifikáciu nádorových antigénov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke