B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 is een door het Epstein-Barr-virus (EBV) geïmmortaliseerde menselijke B-lymfoblastoïde cellijn die is opgezet uit tumor-infiltrerende B-cellen (TiBc) geïsoleerd uit een primair colorectaal carcinoom met de aanduiding HROC68. De oorspronkelijke tumor was een sporadisch colorectaal carcinoom dat was verwijderd bij een volwassen mannelijke patiënt met een vergevorderd stadium van de ziekte. Vers tumorweefsel werd mechanisch gedissocieerd en B-cellen werden gekweekt in aanwezigheid van EBV-bevattend supernatant afkomstig van de B95/8 marmoset-cellijn, samen met cyclosporine A om de groei van T- en NK-cellen te onderdrukken. Langdurige kweek resulteerde in monoklonale expansie van B-cellen, zoals bevestigd door immunoglobuline-genherschikkingsanalyse met behulp van BIOMED-2 multiplex PCR-protocollen, wat een enkel dominant herschikkingspatroon aantoont dat consistent is met klonale oorsprong.

B-LCL-HROC68 scheidt immunoglobuline G (IgG) af als zijn exclusieve isotype, met een stabiele productie gedurende langdurige kweek. Bij celgebaseerde ELISA-screening tegen allogene colorectale kankercellijnen (HROC24, HROC46 en HCT116) vertoonde IgG afkomstig van B-LCL-HROC68 meetbare tumorcelbinding, waarbij het sterkste signaal werd waargenomen tegen HCT116-cellen. Daaropvolgende flowcytometrische validatie wees echter op een relatief zwakke bindingsaffiniteit in vergelijking met andere van TiBc afgeleide IgG's. Deze bevindingen geven aan dat B-LCL-HROC68 een monoklonale, antigeen-ervaren tumor-infiltrerende B-cellijn vertegenwoordigt die in staat is om functioneel IgG te produceren met detecteerbare tumorcelreactiviteit, wat een nuttig in-vitro-instrument biedt voor het onderzoeken van humorale immuunresponsen binnen de micro-omgeving van colorectaal carcinoom en voor de mogelijke identificatie van tumor-geassocieerde antigenen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring