B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 是一種由愛潑斯坦-巴爾病毒（EBV）使之永生化的人類 B 淋巴母細胞樣細胞系，源自一例被命名為 HROC68 的原發性結直腸癌中分離出的腫瘤浸潤性 B 細胞（TiBc）。 原始腫瘤為一例來自晚期成人男性患者的散發性結直腸癌。 將新鮮腫瘤組織進行機械性分離，並在含有源自 B95/8 狨猴細胞系的 EBV 上清液，以及用於抑制 T 細胞和 NK 細胞生長的環孢素 A 的存在下，對 B 細胞進行培養。 長期培養導致 B 細胞的單克隆擴增，這點已透過採用 BIOMED-2 多重 PCR 協議進行的免疫球蛋白基因重排分析所證實，顯示出與克隆起源一致的單一優勢重排模式。

B-LCL-HROC68 分泌的唯一同型別為免疫球蛋白 G（IgG），且在長期培養過程中能穩定產生。 在針對同種異體結直腸癌細胞系（HROC24、HROC46 和 HCT116）的細胞基ELISA篩選中，源自 B-LCL-HROC68 的 IgG 顯示出可測量的腫瘤細胞結合能力，其中對 HCT116 細胞的訊號最強。 然而，後續的流式細胞術驗證顯示，相較於其他源自 TiBc 的 IgG，其結合親和力相對較弱。這些發現表明，B-LCL-HROC68 是一種單克隆、 曾接觸過抗原的腫瘤浸潤性 B 細胞系，能夠產生具有可檢測腫瘤細胞反應性的功能性 IgG，為研究結直腸癌微環境中的體液免疫反應，以及潛在的腫瘤相關抗原鑑定，提供了一種有用的體外工具。

37°C，5% CO_₂，加濕環境。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。

詳情請參閱我們的 《保固聲明》。