B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 yra Epstein-Barr viruso (EBV) nemirtinga žmogaus B limfoblastoidų ląstelių linija, sukurta iš naviko infiltruojančių B ląstelių (TiBc), izoliuotų iš pirminio kolorektalinio karcinomo, pavadinto HROC68. Pirminis navikas buvo sporadinio tipo kolorektalinis karcinomas, pašalintas iš suaugusio vyro, sergančio pažengusia ligos stadija. Šviežias naviko audinys buvo mechaniniu būdu suskaidytas, o B ląstelės buvo kultivuojamos EBV turinčio supernatanto, gauto iš B95/8 marmosetų ląstelių linijos, kartu su ciklosporinu A, siekiant slopinti T ir NK ląstelių augimą. Ilgalaikis kultivavimas lėmė monokloninę B ląstelių ekspansiją, patvirtintą imunoglobulino geno pertvarkymo analize, naudojant BIOMED-2 daugialypės PCR protokolus, parodančius vieną dominuojantį pertvarkymo modelį, atitinkantį kloninę kilmę.

B-LCL-HROC68 išskiria imunoglobuliną G (IgG) kaip išskirtinį izotipą, kurio gamyba yra stabili per ilgą kultūravimo laikotarpį. Ląstelių pagrindu atliktame ELISA skrininge prieš alogenines kolorektalinio vėžio ląstelių linijas (HROC24, HROC46 ir HCT116) iš B-LCL-HROC68 gautas IgG parodė matomą naviko ląstelių prisijungimą, stipriausias signalas buvo pastebėtas prieš HCT116 ląsteles. Tačiau vėlesnis srauto citometrinis patvirtinimas parodė palyginti silpną prisijungimo afinitetą, palyginti su kitais TiBc gautais IgG. Šie rezultatai rodo, kad B-LCL-HROC68 yra monokloninė, antigeną patyrusi naviką infiltruojanti B ląstelių linija, galinti gaminti funkcionalų IgG su aptinkamu naviko ląstelių reaktyvumu, suteikianti naudingą in vitro priemonę humorinių imuninių atsakų tyrimui kolorektalinės karcinomos mikroaplinkoje ir potencialiam navikų antigenų identifikavimui.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime