B-LCL-HROC68

Το B-LCL-HROC68 είναι μια αθανατοποιημένη με τον ιό Epstein-Barr (EBV) ανθρώπινη κυτταρική σειρά Β λεμφοβλαστικών κυττάρων που δημιουργήθηκε από Β κύτταρα που διεισδύουν σε όγκους (TiBc) που απομονώθηκαν από ένα πρωτοπαθές καρκίνωμα του παχέος εντέρου με την ονομασία HROC68. Ο γονικός όγκος ήταν ένα σποραδικό καρκίνωμα του παχέος εντέρου που αφαιρέθηκε από έναν ενήλικα άνδρα ασθενή με προχωρημένο στάδιο της νόσου. Ο φρέσκος όγκος διαχωρίστηκε μηχανικά και τα Β κύτταρα καλλιεργήθηκαν παρουσία υπερκείμενου υγρού που περιείχε EBV, το οποίο προήλθε από την κυτταρική σειρά B95/8 marmoset, μαζί με κυκλοσπορίνη Α για την καταστολή της ανάπτυξης Τ και ΝΚ κυττάρων. Η μακροχρόνια καλλιέργεια είχε ως αποτέλεσμα τη μονοκλωνική επέκταση των Β κυττάρων, όπως επιβεβαιώθηκε από την ανάλυση αναδιάταξης του γονιδίου της ανοσοσφαιρίνης χρησιμοποιώντας πρωτόκολλα BIOMED-2 multiplex PCR, αποδεικνύοντας ένα ενιαίο κυρίαρχο μοτίβο αναδιάταξης σύμφωνο με την κλωνική προέλευση.

Το B-LCL-HROC68 εκκρίνει ανοσοσφαιρίνη G (IgG) ως αποκλειστικό ισοτύπο, με σταθερή παραγωγή κατά τη διάρκεια παρατεταμένης καλλιέργειας. Σε κυτταρική διαλογή ELISA έναντι αλλογενών κυτταρικών σειρών καρκίνου του παχέος εντέρου (HROC24, HROC46 και HCT116), η IgG που προέρχεται από B-LCL-HROC68 έδειξε μετρήσιμη σύνδεση με καρκινικά κύτταρα, με το ισχυρότερο σήμα να παρατηρείται έναντι των κυττάρων HCT116. Ωστόσο, η επακόλουθη επικύρωση με κυτταρομετρία ροής έδειξε συγκριτικά ασθενή συγγένεια σύνδεσης σε σχέση με άλλες IgG που προέρχονται από TiBc. Αυτά τα ευρήματα υποδεικνύουν ότι το B-LCL-HROC68 αντιπροσωπεύει μια μονοκλωνική, αντιγονικά έμπειρη σειρά Β-κυττάρων που διεισδύουν στον όγκο, ικανή να παράγει λειτουργική IgG με ανιχνεύσιμη αντιδραστικότητα των καρκινικών κυττάρων, παρέχοντας ένα χρήσιμο in vitro εργαλείο για τη διερεύνηση των χυμικών ανοσολογικών αποκρίσεων στο μικροπεριβάλλον του καρκίνου του παχέος εντέρου και για την πιθανή ταυτοποίηση των αντιγόνων που σχετίζονται με τον όγκο.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης