B-LCL-HROC68

B-LCL-HROC68 هو خط خلايا ليمفوبلاستويدية بشرية خالدة بفيروس إبشتاين-بار (EBV) تم إنشاؤه من خلايا B المتسللة إلى الورم (TiBc) المعزولة من سرطان القولون والمستقيم الأولي المسمى HROC68. كان الورم الأصلي عبارة عن سرطان القولون والمستقيم من النوع المتقطع تم استئصاله من مريض بالغ مصاب بمرض في مرحلة متقدمة. تم فصل أنسجة الورم الطازجة ميكانيكيًا، وزُرعت الخلايا B في وجود طبقة سطحية تحتوي على فيروس إبشتاين-بار مشتقة من خط خلايا المرموسيت B95/8، مع سيكلوسبورين A لقمع نمو خلايا T و NK. أدى الاستزراع طويل الأمد إلى توسع أحادي النسيلة للخلايا البائية، كما تم تأكيده من خلال تحليل إعادة ترتيب جينات الغلوبولين المناعي باستخدام بروتوكولات BIOMED-2 multiplex PCR، مما يدل على نمط إعادة ترتيب واحد سائد يتوافق مع الأصل النسخي.

يُفرز B-LCL-HROC68 الغلوبولين المناعي G (IgG) كنوعه الحصري، مع إنتاج مستقر خلال فترة الاستزراع الطويلة. في فحص ELISA القائم على الخلايا ضد سلالات خلايا سرطان القولون والمستقيم الخيفي (HROC24 و HROC46 و HCT116)، أظهر IgG المشتق من B-LCL-HROC68 ارتباطًا قابلًا للقياس بخلايا الورم، مع ملاحظة أقوى إشارة ضد خلايا HCT116. ومع ذلك، أشار التحقق اللاحق باستخدام مقياس التدفق الخلوي إلى قوة ارتباط ضعيفة نسبيًا مقارنةً بـ IgG المشتق من TiBc. تشير هذه النتائج إلى أن B-LCL-HROC68 يمثل خط خلايا B أحادية النسيلة، متمرسة في مقاومة المستضدات، قادرة على إنتاج IgG وظيفي مع تفاعل قابل للكشف مع الخلايا السرطانية، مما يوفر أداة مفيدة في المختبر لدراسة الاستجابات المناعية الخلطية داخل البيئة الدقيقة لسرطان القولون والمستقيم وللتعرف المحتمل على المستضدات المرتبطة بالورم.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان