- Tissue
- עור
- Disease
- פיברובלסט של עור רגיל (שהפך לבלתי-מותי באמצעות SV40; אינו גורם לגידולים)
- Metastatic site
- לא רלוונטי (קו תאי פיברובלסט רגיל; לא דגימת גידול)
- Synonyms
- SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80
Documents
01General information
- Description
- קו תאים זה, שעבר שינוי על ידי SV40, נוצר במקור מתאים שנלקחו מביופסיה של עור אישה בוגרת (זן A) על ידי Todaro et al. בשנת 1963, ולא מרקמת ריאה של עובר זכר בן חמישה חודשים (זן C). לאחר ההדבקה, המורפולוגיה של המושבות הגדלות השתנתה בכך שנוצרו מושבות מסוג פיברובלסטיות ואפיתלואידיות. הייעוד של SV-80 כמקור ריאתי, אשר נשמר לאחר מכן, היה ככל הנראה לא תקף. עם זאת, קו תאים זה יאופיין עוד יותר מבחינת אנטיגן p53 ונוכחות אנטיגן T גדול.
- Tissue
- עור
- Disease
- פיברובלסט של עור רגיל (שהפך לבלתי-מותי באמצעות SV40; אינו גורם לגידולים)
- Metastatic site
- לא רלוונטי (קו תאי פיברובלסט רגיל; לא דגימת גידול)
- Applications
- מחקר בתחום תיקון ה-DNA; ביולוגיה של פיברובלסטים שהפכו לבלתי-מתים באמצעות SV40; ציטוגנטיקה; בדיקות גנוטוקסיות; פיברובלסטים אנושיים תקינים כנקודת ייחוס למחקרי השוואה בתחום הסרטן; ביולוגיה של האנטיגן T הגדול של SV40
- Synonyms
- SV-80
- SV 80
- SV-A clone 80
- SV clone 80
- Simian virus 80
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Cell type
- פיברובלסט
- Tumourigenic
- SMRV: שלילי, כפי שאושר על ידי PCR בזמן אמת
- Karyotype
- מספר מודאלי = 76, טווח = 52 עד 87
- Doubling time
- 20 עד 24 שעות
04Identifiers
- Citation
- SV-80 (מספר קטלוגי Cytion 300345)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0541
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Split ratio
- 1 עד 5
- Seeding density
- 3 עד 5 × 10³ תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 1 עד 2 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- מהיר
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
07Donor
- Donor age
- מבוגר
- Ethnicity
- קווקזי
08Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes