Gå direkt till innehållet
SV-80
Vävnad
Hud
Sjukdom
Fibroblaster från normal hud (SV40-immortaliserade; icke-tumörbildande)
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (normal fibroblastlinje; inte ett tumörprov)
Synonymer
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokument

SV-80

Cell line · Produktnummer 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning
Denna SV40-transformerade linje genererades ursprungligen med hjälp av celler som härrörde från en hudbiopsi från en vuxen kvinna (stam A) av Todaro et al. 1963, inte från lungvävnad från ett fem månader gammalt manligt foster (stam C). Efter infektion förändrades morfologin hos de växande kolonierna genom att fibroblastiska och epiteloida kolonityper producerades. Beteckningen att SV-80 var av lungursprung och sedan behölls var troligen ogiltig. Denna cellinje kommer dock att karakteriseras ytterligare med avseende på p53-antigen och förekomsten av stort T-antigen.
Vävnad
Hud
Sjukdom
Fibroblaster från normal hud (SV40-immortaliserade; icke-tumörbildande)
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (normal fibroblastlinje; inte ett tumörprov)
Ansökningar
Forskning om DNA-reparation; biologin hos SV40-immortaliserade fibroblaster; cytogenetik; genotoxicitetsundersökningar; normala humana fibroblaster som referens för jämförande cancerstudier; biologin hos SV40:s stora T-antigen
Synonymer
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Fibroblast
Tumörframkallande
SMRV: Negativt, vilket bekräftats med realtids-PCR
Karyotyp
Modalnummer = 76, intervall = 52 till 87
Fördubblingstid
20 till 24 timmar

04Identifierare

Källa
SV-80 (Cytion katalognummer 300345)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
3 till 5 × 10³ celler/cm²
Vätskeförnyelse
1 till 2 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Snabb
Upptining och odling

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
Vuxen
Etnicitet
Kaukasisk