الانتقال إلى المحتوى
SV-80
الأنسجة
البشرة
المرض
خلايا ليفية من الجلد الطبيعي (مُخلَّدة بفيروس SV40؛ غير مسببة للأورام)
موقع الانتشار
لا ينطبق (سلالة خلايا ليفية طبيعية؛ وليست عينة ورمية)
المرادفات
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

المستندات

SV-80

Cell line · رقم المنتج 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
تم توليد هذا الخط المتحول من فيروس SV40 في الأصل باستخدام خلايا تم اشتقاقها من خزعة جلدية لأنثى بالغة (السلالة A) بواسطة تودارو وآخرون في عام 1963، وليس من نسيج رئوي لجنين ذكر عمره خمسة أشهر (السلالة C). بعد الإصابة، تغيرت مورفولوجية المستعمرات النامية حيث تم إنتاج أنواع مستعمرات ليفية وظهارية. من المحتمل أن تكون تسمية SV-80 من أصل رئوي، ومن ثم الاحتفاظ بها، غير صالحة. ومع ذلك، سيتم توصيف هذا الخط الخلوي بشكل أكبر من حيث مستضد p53 ووجود مستضد T كبير.
الأنسجة
البشرة
المرض
خلايا ليفية من الجلد الطبيعي (مُخلَّدة بفيروس SV40؛ غير مسببة للأورام)
موقع الانتشار
لا ينطبق (سلالة خلايا ليفية طبيعية؛ وليست عينة ورمية)
التطبيقات
أبحاث إصلاح الحمض النووي؛ بيولوجيا الخلايا الليفية المُخلَّدة بفيروس SV40؛ علم الوراثة الخلوية؛ اختبار السمية الجينية؛ الخلايا الليفية البشرية الطبيعية كمرجع لدراسات المقارنة مع السرطان؛ بيولوجيا مستضد T الكبير لفيروس SV40
المرادفات
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
نوع الخلية
الأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
SMRV: سلبي، كما تم تأكيده بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي
النمط الكروموسومي
الرقم النموذجي = 76، النطاق = 52 إلى 87
زمن المضاعفة
من 20 إلى 24 ساعة

04المعرّفات

المرجع
SV-80 (كتالوج سيتيون رقم 300345)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0541

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
3 إلى 5 × 10³ خلية/سم²
تجديد السوائل
1 إلى 2 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
سريع
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
للبالغين
الأصل العرقي
قوقازي