Pāriet uz saturu
SV-80
Audums
Āda
Slimība
Normālas ādas fibroblasti (SV40 imortalizēti; netumorogēni)
Metastāžu vieta
Neattiecas (parasta fibroblastu līnija; nav audzēja paraugs)
Sinonīmi
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumenti

SV-80

Cell line · Preces numurs 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts
Šo SV40 transformēto līniju sākotnēji izveidoja, izmantojot šūnas, kuras Todaro un citi 1963. gadā ieguva no pieaugušas sievietes ādas biopsijas (celms A), nevis no piecus mēnešus veca vīrieša augļa plaušu audiem (celms C). Pēc inficēšanās augošo koloniju morfoloģija mainījās tā, ka radās fibroblastiskas un epitēloīdas kolonijas. Visticamāk, ka apzīmējums, ka SV-80 izcelsme ir no plaušām, un pēc tam tas tika saglabāts, bija nederīgs. Tomēr šī šūnu līnija tiks raksturota sīkāk, ņemot vērā p53 antigēna un lielā T antigēna klātbūtni.
Audums
Āda
Slimība
Normālas ādas fibroblasti (SV40 imortalizēti; netumorogēni)
Metastāžu vieta
Neattiecas (parasta fibroblastu līnija; nav audzēja paraugs)
Pieteikumi
Pētījumi par DNS reparāciju; ar SV40 imortalizētu fibroblastu bioloģija; citogenētika; genotoksicitātes testēšana; normālu cilvēka fibroblastu etalons vēža salīdzinošajos pētījumos; SV40 lielā T antigēna bioloģija
Sinonīmi
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Tumorogēns
SMRV: negatīvs, apstiprināts ar reālā laika PCR
Kariotips
Modālais skaits = 76, diapazons = 52 līdz 87
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
20 līdz 24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
SV-80 (Cytion kataloga numurs 300345)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
3 līdz 5 × 10³ šūnas/cm²
Šķidruma atjaunošana
1 līdz 2 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Fast
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo
Etniskā piederība
Kaukāzietis