Preskoči na vsebino
SV-80
Tkivo
Koža
Bolezen
Fibroblasti normalne kože (imortalizirani s SV40; netumorogeni)
Mesto metastaze
Ne velja (normalna linija fibroblastov; ne gre za vzorec tumorja)
Sinonimi
SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80

Dokumenti

SV-80

Cell line · Številka izdelka 300345

This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis
To linijo, transformirano s SV40, so leta 1963 Todaro in sod. prvotno ustvarili z uporabo celic, ki so jih pridobili iz kožne biopsije odrasle ženske (sev A), in ne iz pljučnega tkiva pet mesecev starega moškega ploda (sev C). Po okužbi se je morfologija rastočih kolonij spremenila tako, da so nastale fibroblastične in epiteloidne vrste kolonij. Oznaka SV-80, da je pljučnega izvora, ki se je nato ohranila, je bila najverjetneje neveljavna. Vendar pa bo ta celična linija dodatno okarakterizirana glede na antigen p53 in prisotnost antigena velikega T.
Tkivo
Koža
Bolezen
Fibroblasti normalne kože (imortalizirani s SV40; netumorogeni)
Mesto metastaze
Ne velja (normalna linija fibroblastov; ne gre za vzorec tumorja)
Uporaba
raziskave na področju popravljanja DNK; biologija fibroblastov, ki so postali nesmrtni zaradi virusa SV40; citogenetika; testiranje genotoksičnosti; referenčni normalni človeški fibroblasti za primerjalne študije raka; biologija velikega T-antigena virusa SV40
Sinonimi
  • SV-80
  • SV 80
  • SV-A clone 80
  • SV clone 80
  • Simian virus 80

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Fibroblast
Tumorigeničen
SMRV: negativen, potrjeno s PCR v realnem času
Kariotip
Modalno število = 76, razpon = 52 do 87
Čas podvojitve
20 do 24 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
SV-80 (kataloška številka Cytion 300345)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0541

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Razmerje delitve
1 do 5
Gostota setve
3 do 5 × 10³ celic/cm²
Obnova tekočine
1 do 2-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Hitro
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
Odrasli
Etnična pripadnost
Kavkaški