- Tissue
- Da
- Disease
- Tế bào sợi da bình thường (được bất tử hóa bằng SV40; không gây ung thư)
- Metastatic site
- Không áp dụng (dòng tế bào sợi bình thường; không phải mẫu khối u)
- Synonyms
- SV-80, SV 80, SV-A clone 80, SV clone 80, Simian virus 80
Documents
SV-80
Cell line · Product number 300345
This SV40-transformed line was originally generated using cells which were derived from a skin biopsy of an adult female (strain A) by Todaro et al. in 1963,...
Customization / Recommendations
- SV-80Cell line€430.00
01General information
- Description
- Dòng tế bào SV40-biến đổi này ban đầu được tạo ra từ các tế bào được lấy từ sinh thiết da của một phụ nữ trưởng thành (dòng A) bởi Todaro et al. vào năm 1963, chứ không phải từ mô phổi của một thai nhi nam 5 tháng tuổi (dòng C). Sau khi nhiễm virus, hình thái của các cụm tế bào phát triển đã thay đổi, với sự xuất hiện của các loại cụm tế bào sợi và biểu mô. Việc xác định dòng tế bào SV-80 có nguồn gốc từ phổi và sau đó được giữ nguyên có lẽ là không chính xác. Tuy nhiên, dòng tế bào này sẽ được đặc trưng thêm về kháng nguyên p53 và sự hiện diện của kháng nguyên T lớn.
- Tissue
- Da
- Disease
- Tế bào sợi da bình thường (được bất tử hóa bằng SV40; không gây ung thư)
- Metastatic site
- Không áp dụng (dòng tế bào sợi bình thường; không phải mẫu khối u)
- Applications
- Nghiên cứu về sửa chữa DNA; Sinh học của tế bào sợi được bất tử hóa bằng SV40; Di truyền tế bào; Thử nghiệm độc tính gen; Tế bào sợi người bình thường làm đối chứng cho các nghiên cứu so sánh về ung thư; Sinh học của kháng nguyên T lớn SV40
- Synonyms
- SV-80
- SV 80
- SV-A clone 80
- SV clone 80
- Simian virus 80
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This SV-80 human fibroblast line contains SV40 T-antigen sequences enabling immortalization for DNA repair and cytogenetics research. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Tương tự biểu mô
- Cell type
- Tế bào sợi
- Tumourigenic
- SMRV: Âm tính, được xác nhận bằng phương pháp PCR thời gian thực
- Karyotype
- Số lượng mô-đun = 76, phạm vi = 52 đến 87
- Doubling time
- 20 đến 24 giờ
04Identifiers
- Citation
- SV-80 (Số catalog Cytion 300345)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0541
05Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Split ratio
- 1 đến 5
- Seeding density
- 3 đến 5 × 10³ tế bào/cm²
- Fluid renewal
- 1 đến 2 lần mỗi tuần
- Post-thaw recovery
- Nhanh
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
07Donor
- Donor age
- Người lớn
- Ethnicity
- Người da trắng
08Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes